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elisa二抗加多了会有什么影响
流式二抗加多了影响有两种如下：有血清培养：在有血清培养时，双抗加多影响细胞活性。无血清培养。在无血清培养时双抗加多了，影响是没有血清的保护，细胞此时是很脆弱的，很容易受到双抗的毒副作用影响。
有血清培养：在有血清培养时，双抗加多基本上无影响。无血清培养；在无血清培养时建议最好不加双抗，因为没有血清的保护，细胞此时是比较脆弱的，很容易受到双抗的毒副作用影响。
显色剂在ELISA体系中是过量的，所以单独显色剂加多了不会使相应的信号值有很大变化的，但是由于显色剂本身就有一定的本底信号值，所以加多的话会有稍许增加显色值。至于会不会出现假阳性这要看具体情况了。
elisa筛选时需要到多少酶标二抗
1、我对于elisa试剂盒不是很了解，我是做化学发光试剂盒的。只能给你一个参考的数值，具体的还要你根据这个对于浓度自己用2倍法进行多次尝试。肿瘤标志物如甲胎蛋白，癌胚抗原的包被量大概在5微克每毫升左右。
2、浓缩生物素化抗体，浓缩酶结合物体积小，运输中颠簸和可能的倒置，会使液体沾到管壁 或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000转/分离心1分钟，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3、④：酶标信号输出 加入带有辣根过氧化酶（Horseradish Peroxidase， HRP）标记的酶标二抗，用于和标准抗体结合。在培养30分钟后洗掉未连接的二抗，并加入显色剂显色。根据显色的结果判断抗原的浓度。
4、这包括酶标板、抗原或抗体、标记的二抗、底物、缓中液等。在准备试剂时，要注意避免受到污染，尽量在洁净的实验环境中操作。同时，要按照实验方案严格控制试剂的使用量，避免浪费和交叉污染。
5、ELISA可用于测定抗原，也可以测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检验方法。
elisa实验中的注意事项
注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。
ELISA实验步骤及注意事项：固相载体选择 聚苯乙烯：具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性。聚氯乙烯：聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高。
室温温育时，ELISA板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证时间精确，一个人一次不宜多于两块板同时操作、测定。 洗涤 洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败。
温育的温度和方式有哪些以及注意事项：温育的温度：育常采用的温度有437℃、室温或4℃等。37℃是实验室中常用的温育温度，也是大多数抗原抗体结合的最适反应温度。
故需强调下面两点：1）比色测定时，一定要注意酶标仪的波长是否已调至合适或所用滤光片是否正确。
elisa检测中二抗时间延长会造成什么影响
1、如果结果背景较高可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。前2步洗涤是为了洗去一抗和二抗的非特异性结合，洗涤的效果直接影响结果背景的深浅，所以洗涤一定要干净。
2、对实验结果产生影响。如果在ELISA实验中加多了抗体，会对实验结果产生影响，过多的抗体可能会干扰反应，使得结果偏高。ELISA就是酶联免疫吸附测定，是免疫学当中的经典试验。
3、孵育过夜一般多见于封闭液。二抗孵育过夜比较少见。因为二抗中酶的活性可能容易受到影响，并且如果在二抗孵育阶段有微生物滋生，后续洗涤步骤少，容易干扰显色。
4、显色问题：显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂导致显色效果减弱：加显色剂时溅出孔外造成液体回流导致实验失败。终止错误：加终止液时产生较多气泡导致假阳性增加。
5、实验条件的控制和调整：在进行Eisa实验时，实验条件的控制和调整是十分重要的。例如，温度、湿度、时间等因素都会对实验结果产生影响因此，在操作过程中，要严格控制这些条件，并及时调整，以保证实验的准确性和可重复性。
6、ELISA实验所有方法的缺点很明显：重复性不好；收自身抗体、嗜异性抗体等干扰，易出现假阳性；不论仪器和手工操作，干扰因素较多。影响最大的是温度和时间。
elisa实验原理是什么?
elisa实验原理是：通过特定抗原与抗体的相互作用来检测和定量分析目标物质。下面将详细介绍ELISA实验的原理：ELISA的基本原理 实验基于抗原与抗体的高度特异性结合，利用酶标记技术和吸附作用进行检测和定量分析。
ELISA，即酶联免疫吸附实验，其基本原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待检标本，通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少。
elisa实验原理是由于抗原、抗体的反应在一种固相载体—聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。
elisa实验原理是在于抗原抗体之间的特异结合反应，所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料，如抗原抗体，酶等。抗原和抗体跟酶交连以后仍然能够保持活性和酶的催化性。
ELISA的基本原理是：1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。
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