本篇目录:
- 1、对流免疫电泳的操作方法
- 2、免疫电泳的检查过程
- 3、对流免疫电泳实验原理
对流免疫电泳的操作方法
方法是先利用区带电泳技术将不同电荷和分子量的蛋白抗原在琼脂内分离开,然后与电泳方向平行在两侧开槽,加入抗血清。置室温或37℃使两者扩散,各区带蛋白在相应位置与抗体反应形成弧形沉淀线(图12-8)。
对流免疫电泳是免疫电泳技术中的一种,还包括免疫电泳、火箭电泳等方法。
在电泳时,抗体不但不能抵抗电渗作用向正极移动,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白带负电荷,将抗原置于负极,将抗体置于正极,电泳后则在两孔之间相遇,并在比例适当的部位形成肉眼可见的沉淀线。
免疫电泳的检查过程
1、(三)操作步骤:用定量吸管吸取热琼脂5ml,平铺于载玻片上。待凝固后,按图形卡,用打孔器打孔,用针挑去孔内琼脂。
2、免疫电泳 免疫电泳为区带电泳与免疫双向扩散的结合,是由Grabar和Williams(1953)首先报道的。方法是先利用区带电泳技术将不同电荷和分子量的蛋白抗原在琼脂内分离开,然后与电泳方向平行在两侧开槽,加入抗血清。
3、免疫电泳首先将抗原加入凝胶中电泳,将抗原各成分依次分散开。然后沿电泳方向平行挖一直线形槽,于槽内加入含有针对各种抗原的混合抗体,让各抗原成分与相应抗体进行自然扩散,形成沉淀线。
4、免疫电泳 免疫电泳(immunoelectrophoresis)的方法分成两个步骤,即先进行电泳,再进行琼脂扩散。先将样品加入琼脂中电泳,将抗原各成分依电泳速度不同而分散开。
对流免疫电泳实验原理
1、该原理是在一定条件下,胶体颗粒是带有电荷的,这些带电胶体颗粒在电的影响下发生移动。
2、【实验原理】抗原抗体在一定的pH溶液中带有电荷,在电场的作用下可发生定向移动。将抗原抗体加入pH6的琼脂凝胶中,抗体只带有微弱的负电荷,而且它的分子量又较大,所以泳动慢。
3、对流免疫电泳实质上是定向加速度的免疫双扩散技术,其基本原理是:在琼脂板上打两排孔,左侧各孔加人待测抗原,右侧孔内放人相应抗体,抗原在阴极侧,抗体在阳极侧。
4、对流免疫电泳是将双向是扩散试验与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术。