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检验技师考点:单克隆抗体的制备原理
【答案】:基本原理:小鼠骨髓瘤细胞在体外适当条件下可无限增殖,但不能分泌抗体,而抗原免疫小鼠的脾细胞(B细胞)能产生抗体,但不能在体外无限增值。将两种细胞融合和就同时具有了无限增殖和分泌抗体的功能。
(3)利用代谢缺陷补救机制筛选出杂交瘤细胞,经有限稀释法,并进行克隆化,然后大量培养增殖,制备所需的各种单克隆抗体。
单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。(1)体内诱生法 取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。
单克隆抗体技术原理如下:由单一B细胞克隆产生的高度均仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。
单克隆抗体技术的重大意义在于可以用不纯的抗原分子制备特异性强、纯度高、均一性好的单克隆抗体。单克隆抗体的应用:①医学诊断;②抗原蛋白的提纯;③肿瘤的导向治疗和放射免疫显像技术。
郁金香碎色病毒的检疫与防治
1、在储存期间的干鳞茎中,郁金香碎色病毒侵染的检测常用DAS-ELISA检查(Schadewijk and Eggink, 1984;Asjes, 1997)。
2、郁金香病虫害的病原菌可由种球携带,也可由土壤携带而感染种球,多发生在高温高湿的环境,主要病害有茎腐病、软腐病、碎色病、猝倒病、盲芽等,虫害多为蚜虫。
3、治疗郁金香病毒病特效药郁金香在发病区,可喷40%的氧化乐果乳油1000倍液进行防治,为减少蚜虫传毒的机会,还可喷洒5%的鱼藤精800-900倍液防治。
人源化抗体怎么工业生产
传统方法免疫动物制备抗体:将通过各种方法获得的免疫原(抗原)注射至动物(比如大鼠、小鼠和兔等)体内,刺激动物体内B细胞分化成熟,产生、分泌抗体,再通过收集动物血清,分离纯化而获得成品抗体。
人源化抗体生产方式:全人源化抗体 采用基因敲出技术将动物抗体基因敲除,造成动物抗体基因缺失,将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术,移至抗体基因缺失动物中,通过动物表达人类抗体,达到抗体完全人源化。
随着DNA重组技术的发展,人们开始用基因工程的方法制备部分或全人源化的基因工程抗体(Genetic engineering antibody),如人-鼠嵌合抗体、改型抗体、双特异性抗体、小分子抗体等。
其他的地方全部人源化。可以产生两种:1》人鼠嵌合抗体和2》完全人源化抗体,具体的原理是1》利用基因重组技术,先得到鼠单抗重轻链可变区的基因片段,将其插入控制人单抗恒定区的基因载体上,表达便可以产生嵌合式抗体。
抗原抗体反应的应用
1、用琼脂双扩散能简便直观地反映不同抗原与同一抗血清,或不同抗血清与同一抗原的交叉反应。 原理1:单克隆抗体(MAb)与抗血清(又称多克隆抗体,PAb)最主要的区别是MAb为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。
2、(1)单向扩散试验:用于测定多种血浆蛋白(如IgG、IgA、IgM的定量测定)。(2)双向扩散试验:可用于鉴定抗原或抗体的特征(包括检测某种抗原,如AFP;检测某种抗体,如抗核抗体)、抗原半定量滴定抗体的效价等。
3、抗原抗体反应(antigenantibodyreaction)是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。可发生于体内(invivo),也可发生于体外(invitro)。
4、elisa技术的原理及应用如下:ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种免疫分析技术,其基本原理是利用抗原-抗体反应的特异性,通过酶与底物反应的放大效应,检测样本中的微量抗原。在ELISA技术中,首先将抗原或抗体固相化在反应板中。
5、抗原与抗体结合后失去致病作用。称中和反应。作用:检测鉴定抗原或抗体。用荧光素、同位素等示踪物质,标记抗原或抗体进行的反应,称标记免疫反应。作用是提高反应灵敏度,可对抗原或抗体进行定量定性检测。
6、乙肝病毒表面抗原测定最常使用的方法是酶联免疫吸附试验(ELISA)中的竞争法。
抗体带的pab是什么意思
单克隆抗体(MAb)与抗血清(又称多克隆抗体,PAb)最主要的区别是MAb为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。所以MAb是B细胞克隆的标志,是一种独特型的抗体,它的特异性是针对一个抗原决定簇的。
什么是血清 传说中为星期狗注射的血清,指的是免疫血清,也称为抗血清,是含有多种抗体成分(又称为多克隆抗体polyclonal antibody,PAb)的血清制剂。
我们知道抗体分单克隆抗体(monoclonal antibody, MAb)和多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb),单克隆抗体是只能与特定的、单一抗原结合的抗体,而多克隆抗体是能与一种以上抗原结合的抗体。
抗糖蛋白抗体是很专业的一个医学名词,只有在进行某些特殊检查的时候才能够看到,对此很多人表示自己不知道抗糖蛋白抗体是什么意思、正常值是多少,下面就是针对该问题的一个总结和介绍。
PAB是英文中乘客气囊的缩写,对应中文中的乘客气囊。PAB灯表示安全气囊关闭,将车钥匙转到ON位置即可解决问题。安全气囊是指安装在汽车上的充气软袋,是安全带的铺设装置。