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兔多克隆抗体的制备流程有哪些啊?
1、用剪刀剪去家兔两后脚掌的部分兔毛,以酒精及碘酒消毒皮肤; 第一次免疫: 用2ml注射器吸取弗氏完全佐剂(FCA)乳化的抗原(人IgG)下称FCA-IgG)液1ml,每侧脚掌皮下各注入0.5ml。
2、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:制备抗原。选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试,看看是否成功免疫。如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。包括纯度以及特异性。
3、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:制备抗原。选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试,看看是否成功免疫。如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。
4、抗体就是能与特异性抗原结合的免疫球蛋白,抗体一般分为多克隆抗体和单克隆抗体,多克隆抗体能与抗原的多个表位结合。
多克隆抗体是怎么合成的?
多克隆抗体是由含多种抗原表位的抗原物质,刺激、活化多个B细胞克隆所产生的针对多种不同抗原表位的抗体混合物。在体内,多克隆抗体是机体发挥特异性体液免疫效应的重要分子,在中和抗原、免疫调理、介导CDC、ADCC中起重要作用。
目的是制备几种单克隆抗体的混杂物。实验方案根据抗原的性质不同而异。下面以制备家兔抗人IgG免疫血清为例作具体说明。
Koheler等用淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,形成了能在体外无限生长,又能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。通过筛选和分离,得到单个细胞杂交瘤系,它能产生针对单一抗原决定簇的抗体,即单克隆抗体。
①免疫方法:对多克隆抗体,免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。
为了准备多克隆抗体,一般会采用基于immunoglobulin gene库(IgG库)的技术。
如何制备兔源多克隆抗体
用剪刀剪去家兔两后脚掌的部分兔毛,以酒精及碘酒消毒皮肤; 第一次免疫: 用2ml注射器吸取弗氏完全佐剂(FCA)乳化的抗原(人IgG)下称FCA-IgG)液1ml,每侧脚掌皮下各注入0.5ml。
多抗一般制备流程:完全抗原的准备→兔子的免疫→ 效价检测和终放→抗体亲和纯化→抗体的浓缩和保存。
多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:制备抗原。选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试,看看是否成功免疫。如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。
②多克隆抗体的制备:将抗原免疫动物(常用的动物为兔、羊、狗等),分离出抗血清并纯化抗体。多克隆抗体的均一性较差,其特异性相对较低,因此,多克隆抗体在农药残留速测技术中的应用受到一定的限制。
早年人工制备抗体的方法主要是以相应抗原免疫动物,获得抗血清。由于抗原常常含有多种不同的抗原表位,加之所获得的抗血清也未经免疫纯化,因此,获得的抗血清实际上是含多种抗体的混合物,即多克隆抗体(polyclonal antibody)。