本篇目录:
- 1、求MAPK、AKT、AP-1、NFkB的western结果,有偿
- 2、蛋白质电泳实验如何封闭一抗?
- 3、蛋白印迹实验中,用脱脂奶还是牛奶封闭好
- 4、AKT和akt抗体
- 5、PI3K/Akt通路中,Akt和p-AKt抗体选择求助
- 6、磷酸化akt抗体
求MAPK、AKT、AP-1、NFkB的western结果,有偿
核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)是多种损伤反应基因的多效调节因子。体系主要涉及机体防御反应、组织损伤及应激、细胞分化和凋亡以及肿瘤生长抑制过程的信息传递。
蛋白质电泳实验如何封闭一抗?
1、抗体除了会和抗原特异性结合,还会由于静电吸附及其他非特异性反应结合在其他位置上,加BSA——就是先加一种蛋白质去可能会和抗体非特异性结合的位点结合先,这个时候在家一抗不就。。
2、接着将膜浸泡在高浓度的蛋白质溶液中温育,以封闭其非特异性位点。
3、制备蛋白样品时,稀释蛋白时量取PBS和蛋白时一定保证数据精确,否则浓度测量不准确,会影响最终的实验结果,可采用在枪头上划线的方式。
4、实验原理 WB 是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。
蛋白印迹实验中,用脱脂奶还是牛奶封闭好
1、因为如果含有脂肪的话,乳脂会与奶粉中的蛋白结合,导致封闭的时候蛋白浓度下降,影响封闭的效果,有可能造成封闭不完全,所以都会用脱脂的奶粉来做。
2、一般使用脱脂牛奶来封闭,目的是要将除目的蛋白外其他无结合蛋白位置封闭起来,防止后面一抗非特异性结合产生较深背景。
3、通过使用脱脂牛奶作为Blocking溶液,可以将抗体溶解在牛奶中,从而增加抗体的溶解性,并减少与膜上的其他蛋白质的相互作用。
4、很抱歉,我不清楚关于westernblot封闭牛奶的信息。westernblot通常指的是蛋白质印迹,这是一种分子生物学实验方法,用于检测样品中特定抗原的相对分子质量。在这个实验中,使用的是脱脂牛奶来封闭非特异性位点。
5、封闭:降低背景,占据膜上剩余的结合位点,使抗体只能与膜上的抗原特异性结合,一般用的是5%的脱脂奶粉,但值得注意的是对于磷酸化的抗体或生物素标记的抗体不能用脱脂奶粉,只能用5%的BSA。封闭时间室温1-2h。
6、封闭及稀释抗体最好用脱脂奶。wb封闭用的还能再稀释抗体,但是效果会变差。不值得浪费你的时间还抗体等试剂,脱脂奶很便宜(比较抗体而言)。建议另用新鲜配置的。
AKT和akt抗体
在抗原表位的磷酸化可显著降低原抗体对抗原的结合能力。也就是说,抗体对磷酸化后的AKT酶的亲和性下降。你指的是对抗体的磷酸化么?现在市售的有针对473位丝氨酸被磷酸化的akt(akt活性是由磷酸化控制的)的抗体。
作用不同 akt:在细胞存活和凋亡中起重要作用。akt1:AKT/蛋白激酶 B信号作用通道调控细胞增殖和生长,参与包括细胞凋亡和葡萄糖代谢在内的细胞过程。akt2:AKT2在PTEN 功能缺失的前列腺癌细胞中发挥了作用。
您好,很高兴为您解细胞因子刺激的信号转导通路:参与细胞的增殖、分化等,获得一个与SV40大T抗原相互作用的蛋白,因其分子并通过PI3K/AKT或Ras/ERK信号通路来发挥作用,因此是有可能的。
PKb,蛋白激酶B,即Akt,又称PKB或Rac,在细胞存活和凋亡中起重要作用。胰岛素等生长和存活因子都可以激活Akt信号途径。Akt的Thr308可以被PDK1磷酸化。
Akt又称PKB或Rac,在细胞存活和凋亡中起重要作用。胰岛素等生长和存活因子都可以激活Akt信号途径。Akt的Ser473可以被PDK1磷酸化。
起激活作用。Akt 通过其普列克底物蛋白同源 (PH) 结构域与 PIP3 相结合,导致 Akt 转位至细胞膜。通过双磷酸化机制,可以激活 Akt。
PI3K/Akt通路中,Akt和p-AKt抗体选择求助
1、您好,很高兴为您解细胞因子刺激的信号转导通路:参与细胞的增殖、分化等,获得一个与SV40大T抗原相互作用的蛋白,因其分子并通过PI3K/AKT或Ras/ERK信号通路来发挥作用,因此是有可能的。
2、因为Akt信号通路是通过 磷酸化而活化的,也就是所谓的P-Akt。
3、PI3K/mTOR是一种胞内磷脂酰肌醇激酶,与v.src和v.ras等癌基因的产物相关;PI3K本身具有丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)激酶的活性,也具有磷脂酰肌醇激酶的活性。PI3K可以和蛋白激酶B(PKB,Akt)的N端PH结构域结合。
4、PI3K/Akt途径——ER介导的PI3K-Akt-NO转导途径中,ER主要靠和其他配体结合成聚合体来起作用,如在血管内皮细胞中,膜ERα与Gai的偶联才促进雌激素刺激eNOS的活化。
磷酸化akt抗体
磷酸化的AKT抗体能够特异性识别磷酸化后的AKT酶,而对未磷酸化的AKT酶亲和力较低,所以可以用磷酸化的AKT抗体来检测AKT酶的磷酸化情况。
起激活作用。Akt 通过其普列克底物蛋白同源 (PH) 结构域与 PIP3 相结合,导致 Akt 转位至细胞膜。通过双磷酸化机制,可以激活 Akt。
磷酸化抗体可以识别蛋白质的磷酸化或者非磷酸化形式,而且可以在避免放射污染的情况下,对磷酸化蛋白进行定性和定量分析,因此特异性磷酸化抗体是研究蛋白质磷酸化的重要工具。
AKT的Ser473是一个蛋白质磷酸化位点,位于AKT(也称为蛋白激酶B)的C-末端。具体来说,Ser473是一个丝氨酸(Serine)残基,它在AKT的序列中被定位在位置473。
你是问AKT的那个人吧?所谓磷酸化抗体是针对一个底物磷酸化和去磷酸化状态下的磷酸化位点而生产的抗体,这样利用底物磷酸化和去磷酸化时和抗体结合型的改变来研究底物是否被磷酸化,从而研究蛋白活性的变化。
特点不同 akt:胰岛素等生长和存活因子都可以激活Akt信号途径。Akt的Thr308可以被PDK1磷酸化。