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细胞自噬
1、自噬作用是普遍存在于大部分真核细胞中的一种现象,是溶酶体对自身结构的吞噬降解,它是细胞内的再循环系统(recyclingsystem)。自噬作用主要是清除降解细胞内受损伤的细胞结构、衰老的细胞器、以及不再需要的生物大分子等。
2、步骤4:自噬体与溶酶体融合形成autolysosome,期间自噬体的内膜被溶酶体酶降解,2者的内容物合为一体,自噬体中的“货物”也被降解,产物(氨基酸、脂肪酸等)被输送到胞浆中,供细胞重新利用,而残渣或被排出细胞外或滞留在胞浆中。
3、自噬(autophagy=self-eating)意为自体吞噬,是真核细胞在细胞自噬相关基因(autophagy related gene,Atg)的调控下利用溶酶体降解自身细胞质蛋白和受损细胞器的过程。
4、细胞自噬(autophagy)的过程(以下有视频讲解)1)细胞接受自噬诱导信号后,在胞浆的某处形成一个小的类似脂质体样的膜结构,然后不断扩张,被称为Phagophore。
5、氯喹:氯喹(Chloroquine)作为溶酶体的抑制剂,可以抑制自噬体与溶酶体的融合从而可以用来作为自噬以及自噬流的抑制剂用于实验研究,推荐使用浓度:10umol-50umol。
lc3b与lc3ii区别
LC3/Atg8 被具有蛋白内切酶活性的 Atg4 在羧基端剪切,生成胞质 LC3-I。
检测LC3II/LCI: lc3参与自噬的形成,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3II升高代表自噬的启动;检测P62:P62可以通过自噬来降解,因此P62可以反映自噬的强弱。
lc3b antibody代表lc3b LC3B能检测内源性的LC3B总蛋白。与其他LC3亚型可能存在交叉反应。与LC3B的II型形式有较强的反应性。该多克隆抗体是通过用合成肽免疫动物制备,该合成肽序列与LC3B蛋白氨基末端附近的残基相一致。
(1)透射电镜,电镜观察自噬体和溶酶体的超微结构; (2)WB检测标志物LC3/Atg8和p62/SQSTM1;生化检测自噬体膜标志蛋白, 特别是ATG1 ATG5 和 LC3;荧光显微镜检测 LC3 或GFP-LC3 斑点的形成;生化检测自噬底物 p62。
顺序弄反了吧。你只能将一个新基因通过blast算法查看他跟哪些已知功能的基因比较相似,从而推断其基因功能。如果ncbi上面没有注释你要查询的所谓新基因的话,你通过blast也比对不上。
专题一:细胞死亡——自噬
步骤1:细胞接受自噬诱导信号后,在胞浆的某处形成一个小的类似“脂质体”样的膜结构,然后不断扩张,但它并不呈球形,而是扁平的,就像一个由2层脂双层组成的碗,可在电镜下观察到,被称为Phagophore,是自噬发生的铁证之一。
自噬过程进行观察和检测 细胞经诱导或抑制后,需对自噬过程进行观察和检测,常用的策略和技术有:观察自噬体的形成 由于自噬体属于亚细胞结构,普通光镜下看不到,因此,直接观察自噬体需在透射电镜下。
自噬(autophagy=self-eating)意为自体吞噬,是真核细胞在细胞自噬相关基因(autophagy related gene,Atg)的调控下利用溶酶体降解自身细胞质蛋白和受损细胞器的过程。
LC3B在自噬过程中是怎样合成与代谢的
当细胞接触到这些压力源时,原本在低水平发生以平衡生物分子的恒定合成的自噬,就会被大幅度上调。 这种上调会增加了细胞的吸收和降解,将大分子释放回胞质中以驱动必须的代谢反应并产生能量。
步骤4:自噬体与溶酶体融合形成autolysosome,期间自噬体的内膜被溶酶体酶降解,2者的内容物合为一体,自噬体中的“货物”也被降解,产物(氨基酸、脂肪酸等)被输送到胞浆中,供细胞重新利用,而残渣或被排出细胞外或滞留在胞浆中。
自噬作用名词解释如下:自噬作用(autophagy)是一种细胞清除机制,旨在清除细胞质中的有害蛋白质、细胞器和其他污染物。