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单克隆抗体技术的程序
1、【答案】：单克隆抗体技术是1975年英国科学家将产生抗体的淋巴细胞与肿瘤细胞融合建立起来的一项技术。是将能产生抗体的淋巴细胞和无限繁殖的肿瘤细胞，通过细胞融合获得既能产生抗体又能无限繁殖的细胞。
2、（一）脾细胞 1．材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2)1640培养液 单克隆抗体制备流程 (3)5％FCS－1640营养液 2．操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。
3、（1）显微操作法：在显微镜下取单细胞，然后进行单细胞培养。这种方法操作复杂，效率低，故不常用。
4、从培养液或腹腔积液获得的单克隆抗体，不需要纯化即可应用于日常诊断或定性研究。如果用于免疫标记测定，须分离和纯化。可用半饱和、饱和硫酸铵进行沉淀，进行初步浓缩和纯化；可用亲和层析法进一步纯化。
制备单克隆抗体常用什么作为诱导剂
PEG细胞融合可用于制备单克隆抗体，通过将免疫细胞与非免疫细胞融合，可以诱导免疫细胞产生针对特定抗原的抗体，为生物医药产业提供关键的生物药物。
(2)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个杂种细胞，说明细胞膜具有流动性。
聚乙二醇或物理因素来诱导，氯化钙不能作为诱导剂，氯化钙的作用是在基因工程中用于增大细胞壁的通透性，便于重组质粒进入微生物的细胞内。考点：本题考查动物细胞工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点的能力。
(2)杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。(3)单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。
（1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
hybridcell）。诱导动物细胞融合的意义：突破了有性杂交方法的局限，克服了远缘杂交的不亲和性，使远缘杂交成为可能，为制造单克隆抗体提供了条件。成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。
简述单克隆抗体的制备过程及原理。
单克隆抗体的制备过程中，首先要给实验动物注射抗原，以获取相应的B淋巴细胞。将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选，以获得杂交瘤细胞。
（1）显微操作法：在显微镜下取单细胞，然后进行单细胞培养。这种方法操作复杂，效率低，故不常用。
【答案】：单克隆抗体技术是1975年英国科学家将产生抗体的淋巴细胞与肿瘤细胞融合建立起来的一项技术。是将能产生抗体的淋巴细胞和无限繁殖的肿瘤细胞，通过细胞融合获得既能产生抗体又能无限繁殖的细胞。
进行体内或体外培养。体内培养就是将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔，将来从腹水中提取。
(2)将免疫B细胞与骨髓瘤细胞杂交，产生杂交瘤细胞，保持双方亲代细胞产生抗体与无限繁殖的特性。(3)利用代谢缺陷补救机制筛选出杂交瘤细胞，经有限稀释法，并进行克隆化，然后大量培养增殖，制备所需的各种单克隆抗体。
已知目标基因名字,NM号,如何快速获得针对它的单克隆抗体的方法?
将层析柱充分洗脱后，改变洗脱液的离子强度或pH，欲分离的抗原与抗体解离，收集洗脱液便可得到欲纯化的抗原。
所以，希望将肿瘤抗原对应单克隆抗体的可变区基因“绑定”至T细胞受体编码基因上，形成改造的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)，然后将这种类型的细胞在体外扩增、纯化后回输至体内发挥作用。
何大一团体利用单克隆抗体作为触发器对一名患者进行了治疗。“他病得相当严重，我们只好停止了治疗，”何大一回忆说，“这太吓人了。”而类似的另一次尝试几乎要了一名患者的命。
