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如何选择一抗,二抗!如何选择实验需要的抗体!最优回答!
1、一抗选择实验类型的种属,二抗选择种属来源。一抗确定你的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,还是FACS,确定实验样本的种属,Human,Mouse,还是Rat。
2、如果一抗为多克隆抗体,由于多克隆抗体主要是IgG类,因此相应的二抗应该选择抗IgG抗体。
3、第三要根据你的一抗来源选择你的二抗,比如你的一抗选的是小鼠来源的抗体,你的二抗就要选择XX抗小鼠的,如果你的一抗选的是兔源性的抗体,二抗就选择XX抗兔的。
4、抗体的选择 作为western来讲,理论上单抗比多抗的特异性要好,但单抗种类较少一般价格偏高,所以一般来说多抗足够了。
5、比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊,兔,马等。一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记。
抗原抗体反应四大检测方法
凝集反应:直接凝集反应(破片法、试管法)、间接凝集反应、间接凝集抑制试验(诊断抗原、诊断血清、检测标本)、协同凝集试验。
(1)单向扩散试验:用于测定多种血浆蛋白(如IgG、IgA、IgM的定量测定)。(2)双向扩散试验:可用于鉴定抗原或抗体的特征(包括检测某种抗原,如AFP;检测某种抗体,如抗核抗体)、抗原半定量滴定抗体的效价等。
elisa的四种方法类型分别是夹心法、竞争法、间接法、捕获法。资料拓展 elisa是一个专有名词,的意思是酶联反应。酶联反应的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
借助抗原和抗体在体外特异结合后出现的各种现象,对样品中的抗原或抗体进行定性、定量、定位的检测。 抗原与抗体的亲和力(affinity)抗原抗体的结合就像酶与底物的结合,激素与其受体的结合一样不是化学的反应,而是非共价键的可逆的结合。
临床上检测抗原最常用的方法
间接法:直接包被固相抗原,用来检测抗体的然后添加标记二抗反应,本法只要更换不同的固相抗原,可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。
ELISA检测抗原时,根据其测定抗原的不同有不同的测定方法:蛋白大分子抗原用得最多的是双抗体夹心法,而对于只有单个抗原决定簇的小分子,则使用竞争抑制法。
【答案】:A ELISA中竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体;间接法是检测抗体最常用的方法;双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法;捕获法用于检测IgM抗体。
正确答案:A 解析:ELISA技术中,最常用来检测抗原的方法是双抗体夹心法 。