专一性抗体检测,专一抗体检测原理

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酶免疫技术是利用酶催化底物反应的生物放大作用，提高特异性抗原-抗体免疫学反应检测敏感性的一种标记免疫技术。

临床检验师考点：酶免疫技术酶免疫技术是将抗原抗体反应的特异性和酶高效催化反应的专一性相结合的一种免疫检测技术。

酶联免疫法，简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。

双向扩散试验，抗原分子量大，则：(沉淀线弯曲线抗原方向)。

1、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。

2、所以最后体内体外培养前还有一步分离各种杂交瘤细胞，专一抗体阳性检测是为了保证我们现在所需要制备的这种单克隆抗体一直存在，避免实验操作失误导致产生的这种单克隆抗体的杂交瘤细胞死亡。

3、如果能选出一个制造一种专一抗体的浆细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体，称为单克隆抗体。

4、原理是把细胞放到HAT选择培养基中培养，未融合的细胞不能合成核酸，就会死亡。未融合细胞次黄嘌呤转移酶和胸腺苷酶活性正常，不能合成核酸。融合细胞可以通过旁路合成核酸，从而存活。

5、过程 1）免疫脾细胞的制备制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。

6、所以制备单克隆抗体的技术又称杂交瘤技术(hybredoma technique)。基本原理其原理是：B淋巴细胞能够产生抗体，但在体外不能进行无限分裂；而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代，但不能产生抗体。

克隆化培养即单细胞培养技术，用有限稀释法进行杂交瘤细胞克隆化培养，可以及时确定阳性杂交瘤细胞株，同时淘汰因发生染色体丢失或抗体的轻、重链基因分离而出现无抗体分泌阴性细胞株。

所谓克隆化培养就是扩大培养，也就是增加杂交瘤细胞的数量，可以提高单克隆抗体的产量，这里的克隆指的是无性繁殖，与克隆羊多莉是不同的。

笔者体会阳性杂交瘤出现的高峰与小鼠血清抗体的滴度并无明显的平行关系，且多在血清抗体高峰之前。因此，为达到最高的杂交瘤形成率需要有尽可能多的浆母细胞，这在最后一次加强免疫后第3天取脾进行融合较适宜。

【答案】：B 阳性杂交瘤细胞的克隆化（单个细胞培养）方法包括有限稀释法、显微操作法、荧光激活细胞分选仪、软琼脂平板法。其中实验室最常用的是有限稀释法。

ELISA是酶联免疫吸附试验，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。基本反应类型有间接ELISA、（双抗体）夹心ELISA(或捕捉ELISA)、竞争ELISA(或阻断ELISA)。

ELISA是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay ， ELISA) 的简称。它是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。

ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。

酶联免疫吸附测定（ELISA）为免疫学中的经典实验。基本原理为：使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。

Elisa：酶联免疫吸附试验，是将抗原抗体反应特异性和酶的高效催化作用相结合而发展起来的一种免疫检测技术，既可用于抗原的检测，又可以由于抗体的检测。根据检测方法的不同可分为双抗体夹心法，间接竞争法。

你好，专一抗体是指只针对一种抗原的抗体，阴性指检测没有反应，阳性指检测有反应，单一抗体阳性就是检测有反应的，说明你疑似感染该病。

呈阴性（未出现抗原抗体特异性免疫反应）就不是符合条件的杂交瘤细胞。

专一性抗体是只针对一种抗原的抗体。阴性指检测没有反应，阳性指检测有反应。如果单一抗体阳性就是有反应的，指示你疑似患该病了。。

检测阳性，就是能产生特定抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。

专一性抗体是只针对一种抗原的抗体。阴性指检测没有反应，阳性指检测有反应。内吞体是吞噬细胞吞噬外物后形成的结构。M6P是一种亚细胞标记。

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