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用抗体治疗癌症的原理是什么?
1、免疫治疗是指用自身的免疫系统去治疗疾病的一类方法。通过调动患者自身抵抗力(免疫细胞)来抵御、杀死肿瘤细胞,是近年来肿瘤治疗的一个发展方向,也是当前癌症研究领域中的热点之一。
2、抗体药物靶向治疗癌症涉及多种机制,干扰信号传导及其与免疫系统的相互作用是治疗性单抗在癌症治疗中最重要的两个性质。
3、癌症免疫治疗是利用个体免疫系统的部分功能来达到对抗癌细胞,主要可透过免疫系统直接辨认肿瘤伴随抗原 (tumor associated antigen)而攻击癌细胞的主动免疫治疗,或者透过使用单株抗体或细胞激素达到加强免疫攻击反应。
单克隆抗体的制备技术路线和关键点
1、腹水中单克隆抗体含量可达到5~10mg/ml,这是目前最常用的方法,还可将腹水中细胞冻存起来,复苏后转种小鼠腹腔则产生腹水块、量多。
2、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤。(1)抗原制备。(2)免疫动物。(3)免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备。(4)细胞融合。(5)杂交瘤细胞的选择培养。(6)杂交瘤细胞的筛选。(7)杂交瘤细胞的克隆化。
3、)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。
4、【答案】:经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌单一抗原表位的特异性抗体,是单克隆抗体。
单克隆抗体的优点与缺点分析
单克隆抗体优点:纯度高,灵敏度高,特异性强,交叉反应少,制备的成本低。缺点:对技术有一定的要求,而且通过抗原的化学处理很容易丢失表位。
单克隆抗体优点纯度高,灵敏度高,特异性强,交叉反应少,制备的成本低缺点对技术有一定的要求,而且通过抗原的化学处理很容易丢失表位 既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体。
单克隆抗体的优点:(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断的生产高特异性、高均一性的抗体。(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。
荧光抗体的保存方法
应该可以。以0~4℃或-20℃低温保存,防止抗体活性降低和蛋白变性。最好加入浓度为1:5000~10000的硫柳汞或1:1000~5000的叠氮钠防腐,小量分装如0.1~1ml,真空干燥后更易长期保存。
封片:为了长期保存,我们一般用缓冲甘油等封片,此外还有专门的抗荧光萃灭封片液。
荧光抗体的保存应注意防止抗体失活和防止荧光猝灭。最好小量分装,-20℃冻存,这样就可放置3~4年。在4℃中一般也可存放1~2年。