本篇目录:
- 1、流式细胞术分析淋巴细胞时,所用的抗体该如何选择
- 2、怎样理解T细胞阳性选择和阴性选择过程
- 3、如何选择一抗,二抗!如何选择实验需要的抗体!最优回答!
- 4、如何选择抗体
- 5、免疫荧光检测t细胞cd4抗原,荧光素为什么要加在cd4单克隆抗体上
流式细胞术分析淋巴细胞时,所用的抗体该如何选择
但是我们我们搭配的时候只能选择其中1个。各个通道之间的荧光素可以随意搭配:如果客户的流式细胞仪能做4个通道,在第1个原则之下,那么每个通道随便选出1个荧光素就可以组合成4个颜色。
第一种是检测细胞内的,需要固定和通透细胞膜,然后加抗体染色,在洗去未结合的抗体 另外一种是荧光小珠为基础的,检测溶液内细胞因子。可以同时检测一个系列。小珠按照荧光种类和强弱的不同,表面事先固定好了相应的抗体。
一般都是先得到全血,然后染色,一般是CD45,CD3加CD20三种抗体。染色后裂解红细胞。T细胞是CD45和CD3双阳性的,B细胞是CD45和CD20双阳性。上机设置分选门后分选即可。
不加任何抗体的,用来调节FCS和SCC 3个管子,分别加了同型非特异抗体,经过了孵育和洗涤。
可以选择抗IgG的二抗。如果单克隆一抗为小鼠IgG的某一亚类,那么除了选择抗IgG的二抗外,还可以选择针对该亚类的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。如一抗同型为小鼠IgG1,那么可以选择抗IgG二抗或抗IgG1二抗。
怎样理解T细胞阳性选择和阴性选择过程
1、【答案】:T细胞发育进入双阳性阶段时开始表达CD4+CD8+,CD3的表达水平逐渐升高。
2、阳性选择指的是只有在胸腺皮质发育中识别MHC分子的T细胞才能生存;阴性选择指的是只有在胸腺髓质发育中不予自身抗原反应的T细胞才能生存。
3、T细胞在胸腺中成熟过程中要经历阳性选择和阴性选择。
如何选择一抗,二抗!如何选择实验需要的抗体!最优回答!
1、如果一抗为多克隆抗体,由于多克隆抗体主要是IgG类,因此相应的二抗应该选择抗IgG抗体。
2、一抗选择实验类型的种属,二抗选择种属来源。一抗确定你的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,还是FACS,确定实验样本的种属,Human,Mouse,还是Rat。
3、抗体的选择 作为western来讲,理论上单抗比多抗的特异性要好,但单抗种类较少一般价格偏高,所以一般来说多抗足够了。
4、条件允许尽量选择进口,一抗abcam,Santa,CST等值得信赖,二抗的话国产的就行了。
5、那么你的一抗的反应种属当中,要包括大鼠。第三要根据你的一抗来源选择你的二抗,比如你的一抗选的是小鼠来源的抗体,你的二抗就要选择XX抗小鼠的,如果你的一抗选的是兔源性的抗体,二抗就选择XX抗兔的。
如何选择抗体
1、抗体的选择 作为western来讲,理论上单抗比多抗的特异性要好,但单抗种类较少一般价格偏高,所以一般来说多抗足够了。
2、浓缩型抗体 根据近几年来使用的情况认为,它有许多优点,但也有许多不足之处:①可作为各种疾病检测的常备抗体。
3、如果一抗为多克隆抗体,由于多克隆抗体主要是IgG类,因此相应的二抗应该选择抗IgG抗体。
4、那么你的一抗的反应种属当中,要包括大鼠。第三要根据你的一抗来源选择你的二抗,比如你的一抗选的是小鼠来源的抗体,你的二抗就要选择XX抗小鼠的,如果你的一抗选的是兔源性的抗体,二抗就选择XX抗兔的。
5、WB检测的基本原理不做细述,可根据以下图片脑补一下:WB实验中使用到的有三种抗体:一抗、二抗和内参抗体。
免疫荧光检测t细胞cd4抗原,荧光素为什么要加在cd4单克隆抗体上
利用的原理是抗体与抗原特异性结合。抗cd4的抗体识别并结合了cd4细胞后,带入的药物在原位就杀敌了cd4细胞。这就是单克隆抗体的靶向作用。
检测淋巴细胞亚群可以了解患者机体的免疫功能是否处于平衡状态。某种细胞亚群所占百分比过高或过低,都提示存在免疫功能的紊乱。
CD4是艾滋病病毒的受体,而CD4细胞又属于T细胞,即免疫细胞,因此艾滋病患者最终死于免疫功能丧失。
若标本中有相应抗原存在,则于荧光显微镜下可见发出荧光的抗原抗体复合物 。2 .间接法测组织中抗体是先使待检标本(未知抗体)与未标记的抗原充分反应,再加入用荧光素标记的抗免疫球蛋白抗体(针对特异性抗体的抗抗体)。
抗原或抗体外检测原理根据抗原抗体结合形成免疫复合物的性状与活性特点,对标本中的抗原或抗体进行定性、定位或定量的检测。