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蛋白制备可以使用哪些类型的标签进行融合?
1、xHis标签通常在重组蛋白的纯化中使用,这是因为组氨酸残基的序列可以在特定的缓冲液条件下结合到几种类型固定的离子上(比如镍,钴和铜),从而达到容易 检测和纯化 His标签蛋白的目的。
2、可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。 纯化:组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组蛋白进行分离纯化。
3、FLAG标签,是目标蛋白中一种比较流行的短肽标签,序列为DYKDDDDK,可以与蛋白质的C端或N端融合。由于其包含肠激酶的识别位点(DDDDK),可方便去除,因此比较适合融合在目标蛋白N端。
His标签单抗的His标签背景介绍
His-Tag(组氨酸标签)His-Tag 由6-10 个组氨酸残基组成,分子量不到0.84KD,通常插入在目的蛋白的C 末端或N 末端。His-Tag是目前原核表达最常用的标签,蛋白纯化完之后可以不需切除此标签,也不会对蛋白产生功能影响。
镍,钴,铜是进行纯化His标签蛋白首选的被广泛使用的离子,由于它们在水溶液中对于 组氨酸 和 半胱氨酸 良好的亲和性。
His标签单抗又叫6×His标签单抗,或6×His单克隆抗体,用小鼠制备,HIS可被镍柱吸附,用于纯化重组蛋白。
常见蛋白标签-6xHis标签
1、xHis标签通常在重组蛋白的纯化中使用,这是因为组氨酸残基的序列可以在特定的缓冲液条件下结合到几种类型固定的离子上(比如镍,钴和铜),从而达到容易检测和纯化His标签蛋白的目的。
2、xHis 标签,也称为多组氨酸标签(polyhistidine ),His6标签或hexa组氨酸标签,这是一种在转染的细胞中目标蛋白的C端或N端上由至少6个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列。
3、His 标签:His 标签是最常用的融合标签之一。这个标签通常在蛋白质的N-或C-端附加,通过其亲和性与金属离子结合,从而实现对融合蛋白的纯化和富集。GST 标签:GST 标签是常用的融合标签之一。
4、his标签蛋白就是:六个组氨酸。一般存在于重组蛋白氮端或碳端,便于纯化该重组蛋白,组氨酸可以特异性的结合镍离子,带有组氨酸标签的重组蛋白可以被镍柱吸附,从而达到纯化的目的。