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gapdh内参基因贴抗体
1、Gapdh内参基因贴抗体是用于检测Gapdh表达量的抗体，通常是由兔、小鼠或大鼠制备的多克隆抗体。
2、GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
3、这个基因就是内参基因，这类基因是生物体或者细胞中稳定表达的基因，表达量几乎不变。常用的内参基因如β-actin，gapdh，18s-rrna等。
wb实验流程及注意事项有哪些?
1、注意事项：将A和B两种试剂在保鲜膜上等体积混合；1min后，将膜蛋白面朝下与此混合液充分接触；1min后，将膜移至另一保鲜膜上，去尽残液，包好，放入X-光片夹中。
2、倡议在实验中采用适宜的曝光时间。 条带弥散或外形怪异 有时WB 结果图中条带位置契合预期，但却由于条带弥散、外形怪异等要素招致无法运用，呈现这种状况多半是制胶或电泳过程出了问题，详细如下： ① 电泳时电压、电流过高。
3、WB实验是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）将混合蛋白质样品分离后，利用特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质（例如PVDF膜）上。
4、wb的实验步骤 制样：裂解缓冲液或者超声处理。(使用RIPA裂解液是需按照100：1加入蛋白酶抑制剂)。电泳：根据蛋白大小确定合适的PAGE胶浓度，推荐上样量为20-30ug总蛋白。转膜：湿转和半干转都可。
5、蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot，简称WB。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。
检测基因表达的方法
1、生化反应检测法：主要通过酶反应来检测；免疫学检测法：通过目的蛋白（抗原）与其抗体的特异性结合进行检测，具体方法有Western杂交、酶联免疫吸附法（ELISA）及免疫沉淀法；生物学活性的检测。
2、一般有三种基因检测方法：生化检测、染色体分析和DNA分析。生化检测 生化检测是通过化学手段，检测血液、尿液、羊水或羊膜细胞样本，检查相关蛋白质或物质是否存在，确定是否存在基因缺陷。
3、应用分子杂交进行检测。分子杂交技术：不同的dna 片段之间，dna 片段与rna 片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性，形成新的双螺旋结构。
抗体表达CHO细胞株构建策略与优化
1、靶向CHO细胞关键调节基因， 通过基因工程手段改造和驯化产生CHO细胞亚系，使表现出更好的凋亡抗性、 代谢、 糖基化、 蛋白表达、 细胞周期调节、 增殖、 分泌或细胞骨架动力学。
2、稳转细胞株构建 选择宿主细胞系：选择能够稳定承载外源基因的细胞系作为宿主细胞。常用的细胞系包括HEK29CHO、HeLa等。构建表达载体：设计和构建包含目标基因的表达载体。
3、验证细胞稳定性和表达 在细胞筛选和扩展完成后，需要验证构建的细胞稳定性和表达情况。这可以通过多种方法实现，例如荧光染色、Western blotting等。
4、CHO细胞不仅在药物的生产过程中起着关键作用，也被广泛用于基因分析、基因转移和基因治疗等领域。CHO细胞被广泛应用于生物技术、医疗和疾病研究领域。
