抗体偶联荧光染料「抗体偶联荧光染料方法」

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1、荧光物标记法，神经纤维的末梢可以吸收很多荧光化合物或荧光染料，经轴突逆向运输到细胞体内，从而建立逆行荧光标记法。例如：Kuypers等(1977)用这种方法在荧光显微镜下根据所用荧光物标记物特有的波长显示吸收荧光物的神经细胞。

2、如果是比较两种样品之间蛋白质表达的异同，可以在同样条件下分别制备二者的蛋白质样品，然后在同样条件下进行二维电泳，染色后比较两块胶。

3、如何对牛血清血蛋白荧光标记牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别，它不是一定的，而是多聚物的，有的地方测试数据为70 000，这一数据是在做PCR的时候使用的数据。

4、是将抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在行成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看到发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。

5、荧光标记的蛋白质，它代表蛋白质。所以A B对。细胞膜具有流动性，D对。跨膜运输是载体（或不需要载体）把细包内外的物质运入或运出。荧光的移动与物质跨膜运输无关。

荧光染料有哪些如下：(1)二氨基二苯乙烯二磺酸类直接染料：这类染料色泽鲜艳，牢度适中，直接耐晒橙GGL(C.I.直接橙39)是性能较好的环保型染料。直接耐晒黄3BLL(C.I.直接黄106)为三氮唑直接染料，耐日晒牢度达6～7级。

（一）免疫荧光标记最常用的荧光染料最常用的染料有FITC和藻红蛋白类（PE）及罗丹明等。

目前常用于标记抗体的荧光素有以下几种：异硫氰酸荧光素，四乙基罗丹明，四甲基异硫氰酸罗丹明，酶作用后产生荧光的物质。荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多。荧光素也就是fda。

显带技术中常用的染料是喹吖因荧光染料。资料扩展：染色体经过某种特殊的处理或特异的染色后，染色体上可显示出一系列连续的明暗条纹，称为显带染色体。

荧光素和乙酰基乙酸乙酯。荧光染料来辅助观察，常用的荧光染料包括荧光素和乙酰基乙酸乙酯，这些染料可以通过荧光显微镜观察细胞的形态和颜色变化，帮助鉴别藻类细胞的死亡状态。

异硫氰酸荧光素(FITC) 是一种有机荧光染料，发射波长为520 nm的荧光染料，是目前最常用的荧光标志物；它的激发波长接近488 nm，光量子得率高，但受pH影响较大。目前，这种荧光染料仍用于免疫荧光和流式细胞术中。

1、常用的荧光染料有荧光绿B(EGFP)、荧光红(DsRed)、荧光黄(YFP)、荧光紫(CFP)、荧光橙(CFTR)等。资料扩展：荧光染料是指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。

2、免疫三大标记技术是：免疫荧光技术：免疫荧光技术是一种通过使用荧光染料来标记和检测生物分子（通常是抗体或抗原）的方法。这项技术常常用于检测细胞内和组织内特定蛋白质的位置和分布。

3、只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有：异硫氰酸荧光素（FITC）：为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。

GoldView染料 GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，也可用于RNA染色。

荧光探针可以通过蛋白质交联剂共价结合在单克隆抗体上。免疫荧光标记最常用的染料有异硫氰酸荧光素、藻红蛋白以及AlexaFluor系列染料等。

定义：MitoTracker Red CMXRos 是一种红色荧光染料，用于对活细胞线粒体进行染色，并且该染料的积累取决于膜电位。乙醛固定后，该染料可稳定保存。

荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多。荧光素也就是fda。fda可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较bcecf或calcein的亲水性低，因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。fda也可用于流式细胞仪。

显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高几乎为100%。且对活细胞无毒副作用。DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

流式细胞仪是测定一个或重复的每个颗粒经光路的信号，因此，细胞必须做成单个细胞悬浮状态，不能聚集，也不允许有细胞碎片存在。所用染料必须特异(如特异单抗)，而且不允许渗透至载液中。

1、FITC是应用最为广泛的一种荧光素，经激光激发后发出明亮的黄绿色荧光，最大发射波长为525 nm。Alexa Fluor 488的发射光谱与FITC几乎一致，经激光激发后发出绿色荧光，最大发射波长为519 nm。

2、蛋白检测一般用214nm或280nm，而CE-SDS偏向于测fragment，而不是aggregation，有些降解片段里不一定带有280nm吸收的基团，所以一般用214nm（或220nm）作为检测波长。

3、CY5激发光波长：646nm左右发射光波长：664nm左右。

4、【答案】：A 免疫透射比浊法在抗原抗体反应后，在340nm处测定各管吸光度。

(1)直接法：①优点：操作简便、特异性强、非特异性荧光干扰因素少；②缺点：敏感性偏低，每检查一种抗原需制备相应的特异荧光抗体。

【答案】：A 直接法用特异荧光抗体直接滴加于标本上，使之与抗原发生特异性结合。本法操作简便，特异性高，非特异荧光染色因素少；缺点是敏感度偏低，每检查一种抗原需制备相应的特异荧光抗体。因此本题正确答案是B。

荧光抗体技术间接法比直接法敏感度高十倍的原因如下由于结合在抗原抗体复合物上的荧光抗体显著多于直接法，从而提高了敏感性。

直接免疫荧光法　直接免疫荧光法是利用荧光色素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合，以鉴定未知抗原。本法具有操作简单、时程短、特异性高的优点，但也存在缺点如不能检查抗体，敏感性较差。