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简述常用抗体筛选的试验方法优缺点。
低离子介质法:此方法可以有效的用于检测不规则抗体(IgG性质),此方法缺点是无法排除无临床意义抗体的干扰。
ELISA实验所有方法的缺点很明显:重复性不好;收自身抗体、嗜异性抗体等干扰,易出现假阳性;不论仪器和手工操作,干扰因素较多。影响最大的是温度和时间。
(1)直接法:①优点:操作简便、特异性强、非特异性荧光干扰因素少;②缺点:敏感性偏低,每检查一种抗原需制备相应的特异荧光抗体。
自身抗体检测的理想筛选实验方法是
1、试验中使用的方法有立即离心盐水试验法、低离子强度介质法(Liss)、酶试验法、抗球蛋白试验等等,可按抗体的血清学行为和试验的具体条件选择,但必须做抗球蛋白试验。
2、低离子介质法:此方法可以有效的用于检测不规则抗体(IgG性质),此方法缺点是无法排除无临床意义抗体的干扰。
3、酶联免疫吸附实验(ELISA)是最常见的HIV抗体检测方法,它具有准确性高、价格低廉、判断结果有客观标准、结果便于记录和保存等优点,适合于大批量标本的检测,是献血员筛选和临床诊断最常用的方法。
4、ANA在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性,正常老年人也可有低滴度的ANA。ANA检测在临床自身免疫病诊断与鉴别诊断中是一个重要的筛查试验。
单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法
单克隆抗体制备的过程通常包括两次筛选,分别是初次筛选和终次筛选。这两次筛选的目的是为了从大量的克隆细胞中筛选出具有高亲和力和特异性的单克隆抗体。
第二次筛选:(1)筛选对象:多克隆杂交瘤细胞群体。(即产生多种抗体的脾-瘤细胞混合群体。
A 第一次筛选的原理与方法:第一次筛选是杂交瘤细胞的选择性培养。
在进行单克隆抗体实验时,第一次筛选的目的是为了把与骨髓瘤细胞结合的效应B细胞与其他普通的细胞分离开来,用的是特定的选择培养基。而第二次筛选是为了把我们真正需要的杂合效应B细胞提取出来。
抗体筛选试验用什么方法?
1、低离子介质法:此方法可以有效的用于检测不规则抗体(IgG性质),此方法缺点是无法排除无临床意义抗体的干扰。
2、膜条与斑点法:多个项目一同检测,一次就能检测几个抗体结果出来,合适样本数少,比较全面的检测。
3、方法:通常采用ELISA(酶联免疫吸附测定)或细胞表面抗原检测等技术进行初步筛选。目的:初次筛选的目的是快速鉴定并筛选出对目标抗原具有较高亲和力的克隆细胞。
4、【答案】:B 酶联免疫吸附实验(ELISA)是最常见的HIV抗体检测方法,它具有准确性高、价格低廉、判断结果有客观标准、结果便于记录和保存等优点,适合于大批量标本的检测,是献血员筛选和临床诊断最常用的方法。
5、【答案】:D HIV感染后2~3个月可出现抗体,并可持续终身,此为艾滋病的常规检测指标。HIV抗体检测试验分为初筛和确认试验。初筛试验常用ELISA法、胶乳凝集法和免疫金层析法。确认试验主要用免疫印迹法。
如何筛选动物单克隆抗体
1、方法:通常采用流式细胞术(流式细胞仪)或细胞融合技术进行终次筛选。目的:终次筛选的目的是进一步筛选出具有更高亲和力和特异性的单克隆抗体。
2、选择性培养:选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。
3、融合:将小鼠脾细胞与肿瘤细胞(如SP2/0或NS0细胞)融合,形成杂交瘤细胞。筛选:通过将杂交瘤细胞置于选择性培养基中,筛选出能够产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞。
4、)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。
5、单抗技术是主要由抗原制备,免疫动物,细胞融合,筛选杂交瘤细胞,克隆化培养,单克隆抗体的大量制备与鉴定等一系列实验组成的实验系统,其核心部分是细胞融合。