免疫荧光抗体,免疫荧光抗体技术

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多重免疫组化（mIHC）：主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大(Tyramide signal amplification)是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。

它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。

当然有区别。是免疫领域的两种方法。免疫组化是未必发光，免疫荧光一定会发荧光。这是最基本的区别。建议你去百度下这两个词条。

免疫荧光的一抗浓度一般高于免疫组化的一抗浓度，但是也要看具体情况：因此免疫荧光一般采取二步法，而免疫组化中有biotin放大这一步。所以建议免疫荧光的时候重新摸索浓度，要是采用三步法可能不需要摸索了。

区别如下：免疫组化染色是用一抗与被检测组织中目的蛋白抗原结合，然后HRP等标记的二抗与一抗进行结合，最后通过DAB显色反应，进而确认所要检测蛋白抗原的定位、半定量等目的。

如果免疫组化能做出来，免疫荧光基本是能做出来的，因为原理基本一致，而免疫荧光比免疫组化要敏感。

1、常用荧光二抗的颜色主要有青色、绿色、红色、紫色等，具体如下：青色：如荧光素同型免疫球蛋白（FITC）等标记的一些抗体，激发波长在488纳米左右。

2、二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质，去免疫异种动物，由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIVH5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体，兔抗AIV IgG为第二抗体。

3、通常使用荧光标记的抗体与待检测样品中的特定抗原结合，在荧光显微镜下观察样品的荧光强度，通过荧光信号的强弱判断样品是否含有待检测的抗体或抗原。该方法具有灵敏度高、准确性高、操作简便、效果明显等优点。

4、因为一种一抗只识别一种底物，如果每种一抗都需要荧光标记，那这样成本很高。而二抗既可以和一抗结合，又带有可以被检测出的标记（如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），作用是检测一抗，提高了通用性。

5、比如一抗是鼠抗人，二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊，兔，马等。一抗是单抗，二抗是多抗，是抗一类同种异型的Ig，带有特殊的可产生发光现象的标记。

免疫组化和免疫荧光相同点：两者都是蛋白定位的检测(也就是确定蛋白是表达在细胞核/浆/膜)。

当然有区别。是免疫领域的两种方法。免疫组化是未必发光，免疫荧光一定会发荧光。这是最基本的区别。建议你去百度下这两个词条。

另外，一抗用于做多色免疫组化还需要不断摸索抗体的最佳浓度，所以周期会较长。不像免疫荧光，时间相对短很多。关于光谱，有激发光(Excitation)和出射光(Emission)，图中标出的是Emission。

IF是缩写词，全称为Immunofluorescence，免疫荧光。IF是一种免疫组化检测技术，基于抗体和标记染料对待检物的生物分子进行染色与成像。

免疫荧光可以用于共定位，但也可以用于很多其他应用。共定位不能够说是免疫荧光的主要用途。一楼回答有助于理解共定位，但是“加上红色/绿色荧光蛋白的标签”这种说法并不是免疫荧光的做法。

fmo荧光减一对照(Fluorescence Minus One，FMO)是指实验设计里的所有荧光减去一个荧光后染色的细胞样本。