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对流免疫电泳实验中,抗体端为何接正极
而一般抗原蛋白质常带较强的负电荷,分子又较小,所以泳动快,虽然由于电渗作用泳动速度减慢,但仍能向正极泳动。
在电泳时,抗体不但不能抵抗电渗作用向正极移动,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白带负电荷,将抗原置于负极,将抗体置于正极,电泳后则在两孔之间相遇,并在比例适当的部位形成肉眼可见的沉淀线。
对流免疫电泳中ag端接负极为了使被检测物质能够向阳极方向移动。在对流免疫电泳中,由于蛋白质带有不同的电荷,当它们置于电场中时,会受到电荷的相互作用而移动。
正确答案:E 解析:对流免疫电泳适合测定小分子抗原,抗原带负电荷,泳向正极,抗体在电渗作用下泳向负极 。
因为泳动方向是从负极向正极的。做DNA电泳和蛋白质SDS-PAGE电泳的时候,加样孔都位于负极。因为这两种情况下,样品都带负电荷,在电场中将向正极泳动,所以点样端要置于负极。
抗原抗体反应原理及影响因素是哪些?
1、【答案】:抗原与抗体发生结合反应的物质基础是抗原分子表面的抗原决定基和抗体分子表面的抗原结合部位之间结构的互补性,抗原抗体相互结合,在适宜条件下,出现可见反应。主要特点有:(1)抗原抗体间的结合具有高度特异性。
2、影响抗原抗体反应的因素有两方面,一是反应物自身的因素;二是反应环境条件。
3、第一为抗原与抗体发生特异性结合的阶段,此阶段反应快,仅需几秒至几分钟,但不出现可见反应。
4、反应必须在合适的 pH 环境中进行,pH 过高或过低都将影响抗原与抗体的理 化性质。抗原抗体反应一般在 pH 为 6~9 进行。(三)温度 抗原抗体反应必须在合适的温度中进行,一般以 15~40℃为宜,最适 反应温度为 37℃。
5、反应物自身因素 抗体:浓度、特异性、亲和性和等价带的宽窄都影响抗原抗体反应。应选择高特异性、高亲合力的抗体作为诊断试剂。但单克隆抗体不适用于沉淀反应。
抗体的性质
抗体的一般性质:由于无抗体活性的免疫球蛋白一般很少见,故人们常把抗体与免疫球蛋白等同起来。人类免疫球蛋白有五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。
抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体(天然抗体),如血型ABO型中的抗A和抗B的抗体,和免疫抗体如抗微生物的抗体。
性质不同:抗体是机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。补体是一种血清蛋白质,存在于人和脊椎动物血清及组织液中,不耐热,活化后具有酶活性,可介导免疫应答和炎症反应。
所谓天然抗体是指天然存在于人体的血型抗体,如抗A和抗B抗体,实际上是没有可察觉的抗原刺激而产生的,属IgM性质。
最好在免疫母鸭的基础上,用抗血清或高免卵黄抗体给雏鸭注射,进一步提高雏鸭体内的抗体水平,效果最好,当然也可以仅对雏鸭进行抗体免疫。如果买不到抗体,只能用疫苗免疫母鸭或直接用疫苗免疫雏鸭,效果相对会差些。
抗体带什么电性
1、【答案】:E 在碱性的对流免疫电泳的缓冲液中,抗原抗体均带负电荷,在电场中向阳极移动,但是由于抗体的分子量大,暴露的负电荷少,在电场中向阳极泳动的速度小于电渗的速度,是电渗作用带动其移向负极。
2、对流免疫电泳是免疫电泳技术中的一种,还包括免疫电泳、火箭电泳等方法。
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4、抗体的局部浓度,加快两者的移动速度。由于血清抗原在碱性缓冲液中(pH6)带负电荷,由负极向正极移动,血清抗体由于接近等电点,由正极向负极渗透(电渗效应),比例合适时,二者相遇形成白色沉淀线。此法可定性或定量。
5、负电荷。对流免疫电泳时,大部分抗原在碱性溶液(pH2)中带负电荷,在电场中向正极移动,而抗体球蛋白带电荷弱,在琼脂电泳时,由于电渗作用,向相反的负极泳动。抗原(antigen,缩写Ag)为任何可诱发免疫反应的物质。
6、抗心磷脂抗体检查是多种带负电荷的磷脂为靶抗原的自身抗体。检查疾病不同:抗核抗体当结果出现阳性时,则提示患者出现结缔组织性疾病,抗心磷脂抗体检查阳性时,提示怀孕后会出现胚胎停止发育。
抗体分离纯化的主要方法?
1、以下是几个常用的基于渐进式纯化的单克隆抗体提纯方法:亲和层析:利用抗体特异性识别作用分离抗体。通常会使用吸附剂,例如蛋白A、蛋白G或蛋白L等针对抗体常见的重、轻链、Fc区等部位进行亲和层析。
2、考点:单克隆抗体纯化方法。[解析]目前最有效的单克隆抗体纯化方法是亲和层析法,常用葡萄球菌A蛋白或抗小鼠免疫球蛋白抗体与载体交联,制备亲和层析柱将抗体结合后洗脱,回收率可超过90%。
3、亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。
4、多克隆抗体的提取纯化 批量提取法 称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50g,置于1000ml烧杯中,先以蒸馏水漂浮除去细颗粒,再经酸碱处理后,用0.01~0.05mol/L,pH0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡。
5、①免疫方法:对多克隆抗体,免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。
6、常用凝胶:葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶,分离Ig多用G150。
人体内抗体产生的机理是什么样的?
抗体就是免疫球蛋白,是改变了的球蛋白分子。由特异性抗原刺激产生,抗体的产生是由于抗原侵入人体后引起各种免疫细胞相互作用,使淋巴细胞中的B细胞分化增殖而形成浆细胞,浆细胞可产生分泌抗体。抗体的异质性。
人体的免疫机制有两种,分别是体液免疫和细胞免疫两种。这两种机制均需在抗原的刺激下才能产生作用。比如:体液免疫:它是对外防御,防御外界生物(包括细菌病毒)入侵,使疾病或伤口愈合。
抗体是由活化的B细胞(浆细胞)产生的针对某一特异性抗原而产生的蛋白质,这种蛋白质可以特异性得与相应的抗原结合,从而中和抗原的毒性作用。