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双标记法荧光抗体技术的主要用途是
1、双标记法用不同的荧光素分别标记不同的抗体，对同一标本染色，检测两种相应的抗原。
2、间接免疫荧光抗体技术标记抗体，可用已知抗原检测第一抗体，同时也可用已知第一抗体检测未知抗原。分别用两种荧光素标记两种第一抗体，可同时检测两种抗原。直接法将荧光素标记在第一抗体分子上，只能检测抗原分子。
3、免疫荧光双染是一种在很多医院和实验室常用的一种生物化学检查方法，存在的意义是使用携带有不同颜色荧光标记物的抗体对同一样本中的两种不同抗原进行区分和定位。重免疫标记法可以分为直接发和间接法。
4、荧光标记法主要用于研究生物分子在细胞内的运动和定位，常用于细胞成像、蛋白质相互作用等实验中。
荧光素标记抗体,应用最广泛的是
1、异硫氰酸荧光素（FITC）为黄色或橙黄色粉末，最大吸收波长为490～495nm，最大发射波长为520～530nm，是应用最广泛的荧光物质。
2、(1)异硫氰酸荧光素(FITC)：是目前使用最广泛的荧光素，呈现明亮的黄绿色荧光。(2)四乙基罗丹明(RB200)：为橘红色粉末，呈橘色荧光。(3)四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)：呈橙红色荧光。
3、这是现在最广泛应用的技术。间接免疫荧光法以荧光素标记抗球蛋白抗体，抗体与相应抗原结合后，荧光标记的抗球蛋白抗体与已结合的抗原发生作用，从而推知抗原或抗体的存在。
4、目前常用于标记抗体的荧光素有以下几种：异硫氰酸荧光素，四乙基罗丹明，四甲基异硫氰酸罗丹明，酶作用后产生荧光的物质。荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多。荧光素也就是fda。
5、WB：蛋白质印迹 FITC：异硫氰酸荧光素 IHC-P：石蜡切片的免疫组化技术 IHC：免疫组织化学 蛋白质样品获得：细菌诱导表达后，可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞，真核细胞加匀浆缓冲液，机械或超声波室温匀浆0.5-1min。
什么是荧光素,荧光酶
1、荧光素酶（英文名称：Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyralis的萤火虫体内的荧光素酶。
2、因为植物体内有一种特殊的发光物质——荧光素和荧光酶。生命活动过程中要进行生物氧化，荧光素在酶的作用下氧化，同时放出能量，这种能量以光的形式表现出来，就是我们看到的生物光。
3、荧光素酶是生物体内催化荧光素或脂肪醛氧化发光的一类酶的总称。由于荧光素酶检测简便、灵敏、快速，因此目前荧光素酶基因在基因工程方面已成为广泛使用的报告基因，具有检测灵敏度高，没有信号背景，并且不损害植物的优点。
4、荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多。荧光素也就是fda。fda可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较bcecf或calcein的亲水性低，因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。fda也可用于流式细胞仪。
fitc荧光标记原理
1、免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate，FITC)与相应抗体（或抗原）以化学的方法结合，将荧光标记抗体（或抗原）与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物，用荧光显微镜观察。
2、荧光是物质吸收光照或者其他电磁辐射后发出的光。大多数情况下，发光波长比吸收波长较长，能量更低。但是当吸收强度较大时，可能发生双光子吸收现象，导致辐射波长短于吸收波长的情况发生。
3、victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质，在蓝色波长范围的光线激发下，会发出绿色萤光。这个发光的过程中还需要冷光蛋白质aequorin的帮助，且这个冷光蛋白质与钙离子(ca2+)可产生交互作用。
常用的荧光素主要有哪些
1、A项，FITC：异硫氰酸；B项，PE：藻红蛋白；C项，RB200：四乙基罗丹明；E项，Eu3＋：铕，镧系螯合物。实验室最常用的荧光素是异硫氰酸荧光素。
2、目前常用于标记抗体的荧光素有以下几种：异硫氰酸荧光素，四乙基罗丹明，四甲基异硫氰酸罗丹明，酶作用后产生荧光的物质。荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多。荧光素也就是fda。
3、常用的氨响应荧光素有草莓素、芴酰胺和橙G荧光素。草莓素：草莓素是一种天然的氨响应荧光素，可以通过与荧光素素结合来检测氨的存在和含量。草莓素的生成需要pH值、温度和氨浓度等多种因素的影响。
4、异硫氰酸荧光素（FITC）：为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为384，最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。
5、)FITC 2)RB200 3)TRITC 4）镧系：Eu、Tb 5)PE 6）其它 常见荧光素的特性 1)FITC：黄色结晶粉末，吸收光：490~495nm，发射光：520~530nm，明亮的黄绿色荧光。
6、荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多。目前常用于标记抗体的荧光素有以下几种：异硫氰酸荧光素，四乙基罗丹明，四甲基异硫氰酸罗丹明，酶作用后产生荧光的物质。
