本篇目录:
- 1、影响免疫检测的因素有哪些
- 2、一抗孵育多久
- 3、抗体孵育的转速要求
影响免疫检测的因素有哪些
1、免疫比浊测定的影响因素包括:抗原抗体的比例、抗体的质量、抗原抗体反应的缓冲液、增浊剂。
2、【答案】:E 考点:免疫浊度测定的影响因素。[解析]免疫浊度测定的影响因素包括:抗原与抗体的比例、温度、盐浓度、抗体的质量、增浊剂,以上条件对于免疫浊度测定均有重要影响。
3、 显色时间,一般认为5-10分钟较好。显色时间过长常导致本底着色加深,降低试验的特异性。 用抗原包被NC检测抗体时,待检样品加样不宜过多。加样过多可使相邻的样品混淆,一般5~10μl即可。
4、反应物自身因素 抗体:浓度、特异性、亲和性和等价带的宽窄都影响抗原抗体反应。应选择高特异性、高亲合力的抗体作为诊断试剂。但单克隆抗体不适用于沉淀反应。
5、影响抗原分子免疫原性的因素主要有两种,包括抗原方面的因素和机体因素。抗原方面的因素又可以分为异物性和理化性状。机体因素则包括遗传因素和年龄、性别与健康状态。抗原方面的因素 异物性 异物性是作为抗原的首要条件。
一抗孵育多久
1、一抗一般孵育30.60分钟。一抗就是能和非抗体性抗原(特异性抗原)特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。
2、不可以。一抗是4度,孵育过夜16-20小时即可。孵育过久,会出现非特异性的条带。一抗的孵育时间与温度、抗体浓度有关。通常情况下,在37℃的条件下,孵育1-2小时左右。
3、一抗的孵育时间与温度、抗体浓度有关。一般情况下,在37℃的条件下,孵育1-2小时左右。在室温的条件下,孵育3小时左右。在4℃的条件下,孵育18-24小时左右。
抗体孵育的转速要求
1、②孵育的时间及温度参考试剂盒说明书。如有条件,建议加样孵育时使用shaker震荡仪,推荐轨道直径3mm,转速在500±50rpm。③检测抗体、酶标物的稀释比例、孵育温度、孵育时间严格根据说明书提示。
2、不可以。根据查询39健康网显示,4度孵育一抗需要摇晃,一抗存在沉淀或凝集物通过摇匀,可以使一抗中的成分均匀分散,确保每一次使用时获得一致的浓度和效果。
3、确保一抗的成分均匀分散。通过摇动,可以避免一抗在孵育过程中出现沉淀或凝集,从而确保每次使用时获得一致的浓度和效果。 保证膜与封闭液或抗体的充分均匀接触。
4、一抗的孵育时间与温度,抗体浓度有关。一般情况下,在37°C的条件下,孵育1-2小时左右。在室温的条件下,孵育3小时左右。在4°C的条件下,孵育18-24小时左右。
5、二抗孵育时间为1至2小时。参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温在摇床上缓慢摇动孵育1至2小时。回收二抗。
6、取100ug无内毒素质粒,加入13ml OptiSFM,混匀后加入250ul 转染试剂,再次混匀后室温孵育20min。