alexa荧光抗体,荧光抗体检测

本篇目录：

Alexa Fluor 488是一种荧光染料，可用于偶联抗体。偶联这种染料的抗体可用于免疫荧光染色。

只是激发光（蓝色激光）的波长。FITC和Alexa 488都能在488 这个波长被激发而发出绿色激发光。Alexa488的优点是光线强度大，光褪色少，pH耐受性好。

Alexa Fluor 488是一种常用的非常明亮的绿色荧光探针。它比绝大部分常用的绿色荧光探针更加明亮，更加不容易淬灭，而且背景更低。Alexa Fluor 488的荧光光谱与FITC和Cy2比较接近。

Alexa Fluor 488：激发波长488nm，最大发射波长519nm。

发红光的二抗之所以发绿光，是因为流式里二抗的颜色一般只有红绿两种，而AlexaFluor488是一种常用的非常明亮的绿色荧光探针，其荧光光谱与FITC和Cy2比较接近。

是绿光，594是红光。Alexa Fluor 488和Alex Fluor594标记二抗为Proteintech（PTG）生产的原装产品，用于免疫荧光染色。Alexa Fluor 488是一种常用的非常明亮的绿色荧光探针。

只染了594但488可以激发的原因是，在流式细胞术中，通常使用两种不同的激光光源，即488nm的氩离子激光器和594nm的氦氖激光器。因此，染料的选择是根据激光光源的波长确定的。

pH耐受性好。Alexa Fluor 488-最好的绿色荧光基团Alexa Fluor 488偶联蛋白优于其他荧光素，实验证明比包括Cy2的其他绿色荧光基团都好。不仅亮度更高，而且光稳定性更好。在pH4-10的范围内保持稳定是其另一优越之处。

标记的抗体荧光亮度明显强于Alexa 594标记抗体，在可见光谱的深红色区域内DyLight 594标记二抗是所有免疫荧光实验中最好的选择。另外DyLight荧光标记的二抗比传统的FITC/Cy2以及Alexa 488具有更高的性价比。

紫色：如高亲合力荧光素异硫氰酸物（Alexa Fluor 488）和银箔铂染料（APC）标记的一些抗体，激发波长在650纳米至660纳米之间。

多重免疫组化（mIHC）：主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大(Tyramide signal amplification)是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。

免疫组化和免疫荧光相同点：两者都是蛋白定位的检测(也就是确定蛋白是表达在细胞核/浆/膜)。

当然有区别。是免疫领域的两种方法。免疫组化是未必发光，免疫荧光一定会发荧光。这是最基本的区别。建议你去百度下这两个词条。

它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。

另外，一抗用于做多色免疫组化还需要不断摸索抗体的最佳浓度，所以周期会较长。不像免疫荧光，时间相对短很多。关于光谱，有激发光(Excitation)和出射光(Emission)，图中标出的是Emission。

免疫荧光的一抗浓度一般高于免疫组化的一抗浓度，但是也要看具体情况：因此免疫荧光一般采取二步法，而免疫组化中有biotin放大这一步。所以建议免疫荧光的时候重新摸索浓度，要是采用三步法可能不需要摸索了。

1、是绿光，594是红光。Alexa Fluor 488和Alex Fluor594标记二抗为Proteintech（PTG）生产的原装产品，用于免疫荧光染色。Alexa Fluor 488是一种常用的非常明亮的绿色荧光探针。

2、荧光二抗488和594的主要区别在于激发光波长和荧光染料颜色。488nm激光通常用于激发绿色荧光染料，如DyLight 488，因此，荧光二抗488主要是用来标记绿色荧光。此外，它还具有较高的亮度，与Cy2和FITC结合物相似。

3、发红光的二抗之所以发绿光，是因为流式里二抗的颜色一般只有红绿两种，而AlexaFluor488是一种常用的非常明亮的绿色荧光探针，其荧光光谱与FITC和Cy2比较接近。

4、只染了594但488可以激发的原因是，在流式细胞术中，通常使用两种不同的激光光源，即488nm的氩离子激光器和594nm的氦氖激光器。因此，染料的选择是根据激光光源的波长确定的。

但它可能与其它物种的免疫球蛋白有潜在的交叉反应，DyLight 594标记的抗体荧光亮度明显强于Alexa 594标记抗体，在可见光谱的深红色区域内DyLight 594标记二抗是所有免疫荧光实验中最好的选择。

nm的激发光用TexasRed或相似的滤片。根据查询相关公开信息，使用594nm的激光束激发可以用TexasRed或相似的滤片观察。

因此，染料的选择是根据激光光源的波长确定的。在这种情况下，594nm的染料可以被594nm的激光激发，而488nm的染料可以被488nm的激光激发。所以，即使只染了594的染料，488nm的激光仍然可以激发它。

1、荧光染料有哪些如下：(1)二氨基二苯乙烯二磺酸类直接染料：这类染料色泽鲜艳，牢度适中，直接耐晒橙GGL(C.I.直接橙39)是性能较好的环保型染料。直接耐晒黄3BLL(C.I.直接黄106)为三氮唑直接染料，耐日晒牢度达6～7级。

2、荧光剂的化学名称是荧光增白剂。这是一种荧光染料（白色染料），也是一种复杂的有机化合物，又称光学增白剂、荧光增白剂。

3、（一）免疫荧光标记最常用的荧光染料最常用的染料有FITC和藻红蛋白类（PE）及罗丹明等。

4、常用的荧光剂有硅酸锌、硫化锌镉、荧光黄、桑色素等；荧光剂是一种复杂的有机复合物，其主要成分是二苯乙烯类衍生物，比如一些唇膏、洗衣粉、白色衣物、毛巾当中就含有荧光剂。

5、目前常用于标记抗体的荧光素有以下几种：异硫氰酸荧光素，四乙基罗丹明，四甲基异硫氰酸罗丹明，酶作用后产生荧光的物质。荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多。荧光素也就是fda。