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如何选择一抗,二抗!如何选择实验需要的抗体!最优回答!
1、如果一抗为多克隆抗体,由于多克隆抗体主要是IgG类,因此相应的二抗应该选择抗IgG抗体。
2、抗体的选择 作为western来讲,理论上单抗比多抗的特异性要好,但单抗种类较少一般价格偏高,所以一般来说多抗足够了。
3、一抗选择实验类型的种属,二抗选择种属来源。一抗确定你的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,还是FACS,确定实验样本的种属,Human,Mouse,还是Rat。
4、那么你的一抗的反应种属当中,要包括大鼠。第三要根据你的一抗来源选择你的二抗,比如你的一抗选的是小鼠来源的抗体,你的二抗就要选择XX抗小鼠的,如果你的一抗选的是兔源性的抗体,二抗就选择XX抗兔的。
5、通常情况下,某一特定的实验中可能同时有几种二抗可供选择,如何能选择到适合该实验的二抗,需要综合以下几个方面进行考虑: (1)一抗的种属来源 根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。
6、二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。
为什么要加生物素和tag两种标记抗体
1、稳定性高等等。这种方法的原理是利用链霉亲和素与生物素之间的较强结合能力,通过对抗体的标记,使其成为链霉亲和素与生物素复合体的一部分,从而实现对抗体的定量检测。
2、就是抗体和HRP复合物,标记物的主要作用是催化H2O2分解,使H2O2能够和底物(如OPD TMB等供氢物质)反应发生变色,通过变色的情况,具体是测量OD值,进而来确定抗原与抗体的结合量。
3、用标记抗体或抗原进行的抗原、抗体反应 用荧光素、同位素或酶标记抗体或抗原,用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的标记物与抗原或抗体化学连接之后不改变后者的免疫特性。
4、如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以现在的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。
5、我也问过这个问题。听别人给我解释,说可以直接标记在一抗上然后加底物显色,但是那样的话,放大效果没有加二抗的好。
6、因为亲和素与生物素间极高的亲和力,使反应结合更牢固稳定,而且特异性高;每个亲和素可结合4个生物素,可使反应明显放大;用小子生物素代替酶标记抗体,可减少反应中的空间位阻。
抗原抗体反应的应用
1、用琼脂双扩散能简便直观地反映不同抗原与同一抗血清,或不同抗血清与同一抗原的交叉反应。 原理1:单克隆抗体(MAb)与抗血清(又称多克隆抗体,PAb)最主要的区别是MAb为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。
2、.调理作用(opsonization) 指IgG抗体(特别是IgG1和IgG3)的Fc段与中性粒细胞、巨噬细胞表面相应的Fc受体结合,从而增强吞噬细胞的吞噬作用。
3、抗体与抗原结合时,如果抗原分子是可溶性蛋白质,这种结合就会使抗原分子失去溶解性而沉淀。称抗原抗体沉淀反应。作用是:使抗原分子失去溶解性。
4、抗原抗体反应(antigenantibodyreaction)是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。可发生于体内(invivo),也可发生于体外(invitro)。