tubulin抗体出现了别的条带（βtubulin抗体）

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两种可能，引物特异性不够强，有非特异性扩增；模板存在与扩增靶标重复的基因或序列。

啥也没说就问是不是退火温度啊，56度其实不低了，如果是基因组DNA，你查一下引物会不会配对到其他基因上了，如果是质粒，降低模板浓度，质粒多了什么都能批出来。

原因有以下几种可能：引物特异性不高，在模板上有非特异结合位点。退火温度低导致引物非特异性结合扩增。模板被污染出现异种DNA且被扩增。

1、一般都是β-tubulin吧。另外GAPDH和actin也可以。

2、首先就是b-actin或者一抗抗体有降解的情况，这个只能更换新的内参和一抗另外有可能是上样缓冲液的原因，缓冲液中还原剂有问题，造成了部分二聚体的出现。可以重新配制缓冲液，并且减少煮样的时间。

3、western内参多条带可能的原因有：抗体浓度过高；降低一抗、二抗的浓度。一抗的特异性不足；使用单克隆抗体。

1、NOTE 基于种群聚类，特有等位基因个人理解就是ssr引物1 在位点扩增出的 a b 2个条带（2倍体），ab长度可能相同也可能不相同。如果a条带在所有样本DNA中的长度一样，就不是多态性条带。

2、多态性条带就是如果每个样本在同一个位点都有相同的条带，那么这条带就不是多态性条带。

3、确定结果：如果你的 PCR 条带在预期的位置，并且没有其他明显的非特异性条带，那么你的 PCR 反应可能是成功的。

4、出现特异性条带是正确的现象。说明：实验本身就是想要特异性条带的，这也是我们实验的最终目的。

1、不同点：单抗是一种抗体分子，多抗是多种抗体分子的混合物。单抗一般通过制备杂交瘤，克隆后使其分泌某种抗体，多抗可从动物血清中提取。单抗特异性好，只识别某个抗原表位，多抗特异性稍差。

2、由于单克隆抗体只识别抗原上的单一抗原决定簇，特异性强，少或不产生交叉反应，且可长期无限量供应，因此，单克隆抗体已在植物病毒学上得到了广泛应用。

3、单克隆抗体是由一个B细胞克隆合成的、只能与一种相应抗原表位特异结合的完全均一的Ig。完全均一指的是Ig的血清型、理化性状、与抗原结合的特异性等高度均一。

4、单克隆抗体由同一株B细胞克隆分泌，编码该抗体的基因序列完全一致。只识别单一抗原表位。多克隆抗体则是混合体，有动物体内所有可识别该抗原的B细胞分泌。可识别该抗原上的不同抗原表位。

5、天然的抗原中含有多种特异性的抗原表位，以该抗原刺激免疫系统，体内多个 B细胞克隆被激活，产生针对不同表位的抗体群，即多克隆抗体。优点：a.制备成本低廉且制备速度较快。

1、actin如果都扩不出来那不是反转有问题就是RNA已经降解了。建议检查这两步的样品。建议检查程序，重新反转，如果还是扩不出来的话，重新抽RNA，再不行，回家过年吧。

2、估计跟常温放置有关系，要是多余的那个条带比你的目的蛋白条带小的话，那么可能就是目的蛋白降解了，你可以重新电转再杂交试试。电转后的膜最好要4℃保存。

3、样品问题：样品可能没有充分提取或者制备过程中出现了问题，导致无法在电泳中显示出条带。同时，如果样品中没有任何DNA或RNA，或者样品中含有的DNA或RNA数量较少，也可能导致无法看到结果。