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G0期细胞的重新增殖【Gβ类似蛋白-WDR26对细胞增殖的影响】
1、在最近的研究中,我们构建了稳定转染pCMV-WDR26表达载体的HeLa细胞系,结果显示WDR26蛋白在HeLa细胞系中的过度表达,能够促进细胞分裂,加快细胞的倍增速度。因此,WDR26很可能具有通过MAPK信号途径调节细胞增殖的功能。
2、细胞周期也受机体调节系统的影响,例如肝再生就是由调节系统的作用加速肝细胞增殖。但是肿瘤细胞,由于宿主失去对它的调控,因而恶性增殖。
3、细胞进入G1期后,并不是毫无例外地都进入下一期继续增殖,在此时可能会出现三种不同前景的细胞:①增殖细胞:这种细胞能及时从G1期进入S期,并保持旺盛的分裂能力。
4、细胞状态:细胞的增殖周期受到其当前状态的影响。在细胞生命周期的不同阶段,细胞的增殖能力可能会有所变化。例如,在细胞分裂之后的G1阶段,细胞可能会经历一段休眠期,直到再次进入S相进行DNA复制。
5、P21 是 CDK 的抑制因子, 因此 PCNA 通过和 p21 相互作用, 间接影响细胞周期和增殖。
6、cGMP则能抑制 细胞分化 ,促进细胞增殖 ,在 正常生长的细胞中,cAMP 和cGMP 维持在适当的水平 ,调节控制细胞周期的运转。细胞周期也受机体调节系统的影响,例如肝再生就是由调节系统的作用加速肝细胞增殖。
用pCMV-tag2b构建的小蛋白质粒转染293T细胞后做western没有发现有...
质粒构建有错误;转染效率太低,甚至根本没转进去;western操作有误;抗体不适合做western 等等,你最好多发些信息,才好帮你分析结果。
方法一:western blot and strip通过WB检测所有发生泛素化的蛋白条带,拍照后,将膜strip。
我这么说是因为,膜蛋白确实不好提取,而且提取后可能空间构想改变了,你的抗体可能识别不了了,而标签蛋白是多肽,构象不会受影响,只要不被你的目的蛋白档上就行,所以你可以用标签蛋白的抗体杂交下,试试。
做WESTERNBLOT 的时候,大家往往会摸索一抗、二抗的浓度,封闭时间,曝光时间等等,而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜,甚至重新提蛋白,这样会浪费大量 的时间。其实完全没有必要这样。
蛋白标签根据其功能,大致可以分为检测标签、表达纯化标签和示踪标签三类。