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内参抗体和标签抗体有哪些
GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
常用的核内参抗体有Lamin A、Lamin B、Histone H3，除此之外，其它常见的核蛋白内参还有PCNA、K70、K80等，在一些文献报道中，ErkTATA binding protein(TBP)以及c-Jun、c-Fos等都有使用。
WB检测的基本原理不做细述，可根据以下图片脑补一下：WB实验中使用到的有三种抗体：一抗、二抗和内参抗体。
当然除了GAPDH抗体，β－Actin抗体、β－Tubulin抗体等也是最常见的内参抗体。GAPDH（甘油醛－3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。
搞不太清楚你想说什么。内参抗体一般选择 β-actin，GAPDH。hsp90也OK。一般内参抗体都是鼠源的啊。既然一抗是鼠源，二抗是接HRP的羊抗鼠就很好理解啊。
蛋白标签GFP有多少kD
最开始是 238 个氨基酸的肽链，约 25KDa。然后按一定规则，11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏；圆柱中，α-螺旋把发色团固定在正几乎中心处。
GFP的编码序列是700多bp，编码一个238个氨基酸的蛋白。蛋白质分子量29KDa。
HA标签，属于小标签，共9个氨基酸，标签序列YPYDVPDYA，源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇，对目标蛋白的空间结构影响小， 可融合到N端或者C端，可购买商业化的Anti-HA抗体检测。
GFP，CFP，YFP tagging：适合于观察 蛋白在细胞内的定位，不适合用于一般的蛋白实验，因为本身大小都在25kda左右，而且这样的荧光质粒的蛋白表达量，相比要小一些。
GFP绿色荧光蛋白的检测方法有哪些?
1、对rAcGFP1进行系列稀释 2 在微量比色杯中加入100ul的rAcGFP1稀释后溶液。注意：避免在微量比色杯中出现气泡，负责会引起检测误差。
2、目前在常用的方法就是采用荧光显微镜观察，荧光显微镜在实验室普及，但不足的是必须采集叶片或动物切片进行观察，对培养的标本进行破坏，无法进行活体观察。
3、荧光标记法常用绿色荧光蛋白（GFP）为目标蛋白，通过转基因技术一起构建到载体上，可跟踪和判断生物细胞的分子变化。
4、最直接的就是检测目的蛋白，一般都是用western blot；如果是分泌蛋白，可以做ELISA；如果蛋白有特殊的功能（比如GFP，绿色荧光蛋白），也可以直接检测其功能（比如看有无绿色荧光）。
5、并可维持细胞的形状，是半刚性结构，不能流动。
带GFP标签的菌落发绿色荧光吗
1、gfp绿色荧光蛋白，很直观，能够直接检到荧光，在普通的细胞培养条件下都能够观察到，对细胞的生命活动和其他并行的实验安排影响很小。
2、⑵ 目的基因的功能研究 将目的基因与 gfp基因连接后，通过观测融合 蛋白的荧光特性研究其表达和功能。
3、由于水母整体荧光及提取的蛋白质颗粒荧光都呈绿色，因此，人们将这种蛋白命名为绿色荧光蛋白。GFP具有多种优点：易于检测，灵敏度高；荧光性质稳定，耐受性强；易于表达，无细胞毒性；可用于活细胞检测。
4、绿色荧光蛋白发光不需要其他辅助因子，但必须要有氧。
5、一个氨基酸对应mRNA上3个碱基，也是三个核苷酸，对应的DNA上就是3个碱基对，3*2个核苷酸，所以是238*3*2，但是基因的长度要比这个数值大，因为基因中还有非编码区、内含子这样的序列。
