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血凝实验操作报告
篇一：禽流感血凝和血凝抑制试验 禽流感血凝-血凝抑制试验操作方法及注意事项 禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测，也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态等。
内源性激活途径是指参与血液凝固的所有凝血因子在血浆中，外源性激活途径是指受损的组织中的组织因子进入血管后，与血管内的凝血因子共同作用而启动的激活过程。
血液凝固的过程：①凝血酶原激活物的形成；②凝血酶原激活物在钙离子的参与下使凝血酶原转变为有活性的凝血酶；③可溶性的纤维蛋白原在凝血酶的作用下转变为不溶性的纤维蛋白。
简述禽流感HI抗体检测方法的用途和原理
可用于流感病毒分离株HA亚型的鉴定，也可用来检测禽血清中是否有与抗原亚型一致的感染或免疫抗体。
试验原理：某些病毒能够与人或动物的红细胞发生凝集，称为血凝反应（HA）。这种凝集反应可被加入的特异性血清所抑制，称为红细胞凝集抑制试验，即血凝抑制反应（HI）。
按1：96稀释禽流感病毒H9亚型血凝抑制试验抗原，制成4HA 100单位抗原。3．血凝抑制试验（HI ）1取96孔微量反应板，分别向1~12孔中加入25ul 生理盐水。
AGP是用来检测A型流感病毒群特异性血清抗体，即抗核糖蛋白(RNP)和基质蛋白(MP)抗体，因而适用于鉴定流感病毒 。1979年Beard首次将AGP用于禽流感抗体检测[2]。此法虽简单易行，但是敏感性较差，易出现假阳性。
另外一个情况就是目前家禽都大量做新城疫和禽流感疫苗，其产生的抗体对病毒的繁殖也会有程度不同的抑制作用。但这些可能通过多采患病家禽样本多用几条试纸检测来解决。
可用实验性标准曲线推算出样品中抗原(或抗体)的含量。如免疫单向扩散试验、免疫比浊试验和酶联免疫检测等都属于这类方法。
[血凝与血凝抑制试验标准方法]血凝抑制试验的应用
未凝集的红细胞在V 型血凝孔中呈现为明显的红色圆点。将反应板倾斜45度角后判定结果，当红细胞呈现泪滴状流淌且没有凝集颗粒时为100%抑制。
禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测，也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态等。
①血凝（HA）试验（微量法）a.在微量反应板的1～12孔均加入0.025毫升PBS，换滴头。b.吸取0.025毫升抗原加入第1孔，混匀。
血凝与血凝抑制实验（禽流感和鸡新城疫）用已知抗原来检测被检血清中有无相应的特异性抗体和滴定该特异性抗体的水平。
许多病毒能凝集鸡、豚鼠、人等的红细胞，称为血凝现象。这种现象能被相应抗体所抑制，称血凝抑制试验。常用于含血素的病毒（如流感病毒、乙脑病毒）的辅助诊断和流行病学调查。ELISA：可检测多种病毒抗体，应用广泛。
禽流感的危害
根据禽流感致病性的不同，可以将禽流感分为高致病性禽流感、低致病性禽流感和无致病性禽流感。国内外由H5N1血清型引起的禽流感称高致病性禽流感，发病率和死亡率都很高，危害巨大。
器官衰竭禽流感重症患者除了呼系统重症外，还可合并其他多个系统和器官的损伤或者衰竭，如心力衰竭道行，并且可继发严重的细菌感染，如败血症、感染性休克等，有的重症患者可出现昏迷及意识障碍等。
禽流感病毒有不同的亚型，由H5和H7亚型毒株（以H5N1和H7N7为代表）所引起的疾病称为高致病性禽流感（HPAI），最近国内外由H5N1亚型引起的禽流感即为高致病性禽流感，其发病率和死亡率都很高，危害巨大。
其中，禽流感对家养的鸡和火鸡危害最为严重，近几年来，感染鸭也出现大批死亡。
根据禽流感致病性的不同，可以将禽流感分为高致病性禽流感、低致病性禽流感和无致病性禽流感。最近国内外由H5N1血清型引起的禽流感称高致病性禽流感，发病率和死亡率都很高，危害巨大。
此外，羽绒服、鸭绒被等是不会传染禽流感的。因为羽绒制品通常经过消毒、高温等多个环节处理，病毒存活可能性微乎其微，不太可能对人的健康造成危害。但最好不买小商贩提供的廉价羽绒制品。
禽流感怎么检查
1、病毒分离、病毒抗原与血清抗体检测是诊断禽流感的重要方法。
2、还可用RT-PCR法检测禽流感病毒亚型特异性H抗原基因。病毒分离 从患者呼吸道标本中（如鼻咽分泌物、口腔含漱液、气管吸出物 或呼吸道上皮细胞）分离禽流感病毒。
3、主要有血凝试验、血凝抑制试验、琼脂扩散试验、神经氨酸酶抑制试验、酶联免疫吸附试验、病毒中和试验及免疫荧光试验等。其中血凝和血凝抑制试验、琼脂免疫扩散试验是OIE推荐使用的方法。
