本篇目录:
- 1、gapdh是什么意思
- 2、内参GAPDH,B-ACTIN有什么区别吗
- 3、GAPDH有什么作用
- 4、westernblot内参GAPDH成功了
- 5、gapdh内参基因贴抗体
- 6、上完gapdh的抗体还要上二抗吗
gapdh是什么意思
GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
gapdh分子量是:GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)。是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Westernblot蛋白质标准化的内参。
GAPDH:GAPDH或G3PDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶。B-ACTIN:即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白。分布方式不同:GAPDH:广泛分布于各种组织中的细胞。B-ACTIN:分布在骨架当中。
内参GAPDH,B-ACTIN有什么区别吗
常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD。
western 内参用的GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,B-actin分子量为42KD。严谨的Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系,这对实验结果分析是非常有用。
常用的内参有,ACTB(β-actin、β-肌动蛋白)、GAPDH或18S等。
blot实验中,内参可以是乳腺癌细胞中常见的丰度相对稳定的蛋白质如β-actin或GAPDH。通过将目标蛋白的信号强度除以内参的信号强度,可以得到一个相对的信号值,从而消除了不同样品之间的差异,使得实验结果更加可靠和可比较。
包括GAPDH 、β- actin(BETA-actin) 、18sRNA、28sRNA 、B2M、ACTB、SDHA、HPRTARBP内参基因 等。
内参基因通常是各种看家基因,在细胞内组成稳定性表达,有助于保持细胞的功能。
GAPDH有什么作用
GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
免疫组化:使用Gapdh内参基因贴抗体可以在组织切片中检测Gapdh的表达情况,对于疾病诊断和组织学研究具有重要作用;药理研究:在药理研究中,使用Gapdh内参基因贴抗体可以对药物对细胞或组织的代谢活性产生的影响进行评估。
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
有,GAPDH是三磷酸甘油醛脱氢酶,是糖酵解途径中的关键酶。糖酵解途径就是将葡萄糖转化为ATP的过程,负责为生物体提供能量,几乎所有的生物都有该途径。
GAPDH:GAPDH或G3PDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶。B-ACTIN:即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白。分布方式不同:GAPDH:广泛分布于各种组织中的细胞。B-ACTIN:分布在骨架当中。
westernblot内参GAPDH成功了
今天,早早地过去,就是希望把westernblot的流程完成了。洗膜。1X TBST洗膜,这个我已经提前配置好了,没有压力。5minX3次。孵一抗。按照GAPDH说明书,1:4000稀释一抗。我还以为4ml的一抗稀释液要16ul的抗体。
GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
在生物学试验中,内参通常是一种已知含量或者稳定表达的蛋白质或RNA,用来标准化同一实验中不同样品的数量差异。例如,在western blot实验中,内参可以是乳腺癌细胞中常见的丰度相对稳定的蛋白质如β-actin或GAPDH。
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
gapdh内参基因贴抗体
1、Gapdh内参基因贴抗体是用于检测Gapdh表达量的抗体,通常是由兔、小鼠或大鼠制备的多克隆抗体。
2、GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
3、GAPDH:广泛分布于各种组织中的细胞。B-ACTIN:分布在骨架当中。作用不同:GAPDH:被广泛用作抽提total RNA,poly(A)+ RNA,Western blot等实验操作的标准化的内参。
4、当然除了GAPDH抗体,β-Actin抗体、β-Tubulin抗体等也是最常见的内参抗体。GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。
上完gapdh的抗体还要上二抗吗
二抗都是重复利用的。一般都是使用3次左右(时间不超过5天);做GAPDH时,二抗甚至经常使用5-7次,效果无影响。一抗就是针对你的蛋白的抗体,一般比较特异,若你的蛋白不是常见的,则需要定制(譬如用你的蛋白注射兔子)。
注意如果一抗是在兔子上制作的,那么制二抗时就不用再打兔子了,因为兔子不会对句子的Fc产生免疫反应,不然就会产生自身免疫疾病,自己产生抗体攻击自己。有一部分不幸的人就患有自身免疫疾病。
回收一抗。(请注意,如果你要回收抗体,建议将抗体在冰上孵育,以保证抗体质量)。TBST洗膜三遍,5minX3次。孵二抗。就简单多了。
一抗没染上又染二抗再染一抗步可以。二抗和一抗不是同一种性质工作液,染了二抗重新染一抗是混用会发生反应,是不能用的。二抗和一抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,去免疫异种动物的液体。