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双抗体夹心法检测乙肝病毒表面抗原的意义
原理:双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子,但不适用于小分子抗原。将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。加入待检样品,保温孵育。
乙肝表面抗原检查用于判断是否感染了乙肝病毒。 乙肝表面抗原阳性是感染乙肝病毒的指标,乙肝表面抗原本身具有抗原性,无传染性。 其他肝功能正常而仅仅乙肝表面抗原阳性者,称为乙肝病毒携带者。
乙肝表面抗原阳性,这个提示是感染了乙肝病毒的,因为乙肝表面抗原阳性,这个是感染乙肝病毒的一个重要的标志。目前这种情况下应该做全面具体检查,化验乙肝两对半和功能检查化验还有乙肝病毒DNA定量检查化验包括B超。
(1)乙肝表面抗原(HBsAg)简称表面抗原,其为阳性说明体内有乙肝病毒存在,是机体已经感染乙肝病毒的标志。(2)乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)简称表面抗体,其为阳性说明乙型肝炎进入恢复期,是好转的表现。
通常采用双抗原夹心酶联免疫吸附法进行检测。临床意义:阳性说明对乙型肝炎病毒有免疫力。需与其他乙肝检查项目一起分析结果。
临床意义 乙肝核心抗体(HBcAb)是乙肝病毒核心抗原的对应抗体,它不是保护性抗体,它的存在反而是受到乙肝病毒侵害的指标之一。它包括IgM、IgA、IgG三种类型。
双抗体夹心法的特点
1、双抗体夹心法的优缺点:优点:高特异性,使用的捕获抗体与检测抗体都是检测特异性的;适用于复杂样品,抗原不需要进行纯化即可用于检测;灵活性更大,灵敏度更高,可采用直接法也可采用间接法。
2、灵敏度:直接法的灵敏度比间接法高,因为直接法中检测到的目标抗原分子已经被检测抗体所夹持,因此更容易被检测到。
3、双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:(1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。
4、这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物。
ELISA检测方法的原理及其优缺点是什么
ELISA方法的优点是特异、简便、可同时测定大量标本、易于标准化以及实验废弃物易于处理等,是目前临床上最常用的细胞因子免疫测定方法。其缺点是,测定的是细胞因子的免疫反应性,而不是细胞因子的生物活性。
优缺点 ELISA方法检测灵敏度高,结果准确可靠,但是操作相对复杂,可能会受到干扰物质的影响。EIA方法操作相对简单,对干扰物质也有很好的抗干扰能力,但是在处理样本和结果解释方面存在难度。
elisa实验原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面,加入待检标本,通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少。
ELISA的基本原理 实验基于抗原与抗体的高度特异性结合,利用酶标记技术和吸附作用进行检测和定量分析。基本步骤包括:涂覆固相载体、非特异性结合位点的阻断、特异性抗原与抗体的结合、酶标记二抗的结合、底物添加和反应终止。
\x0d\x0a缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。