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抗原修复的抗体的加入
抗原抗体实验中,可溶性抗原与抗体在其间可以自由扩散,若抗原与抗体相对应,比例合适,在相遇处可形成白色沉淀线,是为阳性反应。所以在向琼脂板上加入时应注意:试验前应做预试验,确定抗体的稀释度。
以沉淀反应为例,若向一排试管中中入一定量的抗体,然后依次向各管中加入递增量的相应可溶性抗原,根据所形成的沉淀物及抗原抗体的比例关系可绘制出反应曲线(图9-1)。
即用型抗体,一般有效期为一年。如果用量大的单位,对于3ml一个包装的抗体,一年需要用几支,这对抗体来说,不会造成浪费。但如果为较小的单位,一年中标记的病例较少,购买抗体时也尽量选小包装的抗体,如5ml。
抗原修复,抗体选择。抗原修复:在免疫组织化学染色过程中,抗原需要被修复以暴露表位,与抗体结合。抗原修复可以通过加热、酶消化等方法实现。抗体选择:选择特异性高、亲和力强的抗体,可以减少非特异性染色。
反应的原理在于补体本身没有特异性,能与任何抗原抗体复合物结合。以检查鼻疽病为例,先向试管中加入已知的抗原(鼻疽菌的浸出液),再加入被检马匹的血清(抗体)和豚鼠血清(补体),这三种成分称为反应系统或溶菌系统。