植物体内有抗体吗-植物中抗体实验怎么做

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1、接种后，逐日观察，并记录其死亡数，观察结束后，计算LD50和中和指数(表7-表7-2)，本法适用于大量检样的检测。

2、关于中和抗体的解释，网上有资料报道中和抗体是由适应性免疫应答细胞分泌的一种可溶性蛋白，能够与病原体表面的抗原结合。

3、Tc细胞、NK细胞、LAK细胞、TIL细胞等对其靶细胞有直接的细胞毒(杀伤)作用。

第七横排的抗原与抗血清的相应抗原是相同的，第四两排抗原与抗血清的相应抗原虽然不同，但有一定亲缘关系，第十排抗原则与抗血清的相应抗原有远缘关系或无血清学关系，第九排的抗原则完全无关。

此外，很多的植物染病无症状。因此病毒的检测和鉴定必须用血清试验和核酸杂交等方法确诊。如用血清学鉴定，需使用针对病毒的不同血清型的每个的典型代表的抗血情；ELISA是一种方便而有效的方法。

【答案】：植物病毒常用的诊断鉴定方法包括生物学测定、电子显微镜技术、仇清学技术和分子生物学技术等。这些方法在植物病毒诊断鉴定中可以相互验证。

单克隆抗体(MAb)：是针专一的抗原决定簇产生的抗体，单克隆技术又名杂交瘤技术，起源于1975年，由G.Khler和Milstein创立。主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞，生产抗体。

进行体内或体外培养。体内培养就是将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔，将来从腹水中提取。

(7)杂交瘤细胞的克隆化。(8)单克隆抗体的检定。(9)分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立。(10)单克隆抗体的大量制备。

单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的，杂交瘤细胞由骨髓瘤细胞和效应B细胞融合而成。

这个B淋巴细胞就是效应B细胞，书上不是加了限定词么“能产生抗体的”LZ要明确一点，不是只要是融合的细胞，它就一定能表达，可能会因为诸多因素使得融合细胞不能分泌抗体，这是个复杂的过程。

最常用的检测方法有凝胶扩散试验、乳胶凝集试验、酶联免疫分析、斑点免疫技术、免疫荧光检验和免疫电镜技术等。血清学反应不仅专化性强，而且十分灵敏，是动、植物检疫中最受重视的先进技术。

血清学诊断和鉴定病毒的方法很多，常见的有ELISA(酶联免疫吸附法)、免疫电镜、琼脂双扩散、免疫电泳等。其中，ELISA(酶联免疫吸附法)为世界公认的植物病毒检测方法。

在动植物检验检疫中有哪些常用的免疫血清学技术和分子生物学技术分子诊断学的研究范畴包括：利用遗传学、病理学、免疫学、生物化学、基因组学、蛋白质组学和分子生物学的理论和方法探讨疾病发生和发展的分子机制。

常用的方法有侵染力测定法、血清学方法、电子显微镜计数和分子生物学法等。1侵染力测定法侵染力测定法是将病毒样本接种在植物上，根据侵染力的大小定量。

血清学技术能利用植物病毒与其抗血清的特异抗原抗体反应来检测鉴定病毒或抗体。血清学技术方便、快速。但是在制备抗血清时，不同病毒制备的抗血清效价不同。有些病毒免疫原性差，制备抗血清困难。

ELISA可检含25～50ng/ml病毒的提纯液，能检出10-4～10-5的病汁稀释液中病毒，应用ELISA间接法可检出种子带毒。西瓜花叶病毒是属于马铃薯Y病毒属。

1、WB实验是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)将混合蛋白质样品分离后，利用特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质(例如PVDF膜)上，再以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原。

2、构建好质粒之后我们一般先酶切鉴定，鉴定正确的可以直接拿去转染然后做WB检测表达即可。可以正常表达的质粒我们需要送到测序公司测序，也可以直接送菌液测序，有些测序公司还提供质粒返还服务(即送菌液返还他们抽提的质粒)。

3、漂洗液WB需要事先加入无水乙醇，特别注意要在无菌条件下用灭过菌的50ml的离心管去加，这样做是引物要尽可能防止过程的污染最后一步，要在把30微升的无菌水打到吸附膜的中央，千万不可偏离。

4、）（3）针对Sub1C蛋白研究的货号AS11 1770抗体将10天龄的水稻幼苗浸没在水中3天，从对照组和实验组的样品中收集地表部分用于蛋白质提取。提取25μg总蛋白用于WB实验，结果如上图所示。一抗稀释比例为1：5000。

5、WB（白平衡）：调节白平衡数值使相机在不同的光线环境中把白色还原为标准白色。数值越高照片色调越暖，数值越低则色调越冷。AF/MF（自动/手动）对焦方式：AF 为自动对焦，相机自动聚焦在被摄物体上。

6、WB检测的基本原理不做细述，可根据以下图片脑补一下：WB实验中使用到的有三种抗体：一抗、二抗和内参抗体。

1、液体培养基在细胞工程和备胎工程中较常见细胞工程中的动物细胞培养是液体的（其中含有血清）胚胎工程中精子获能用的肝素和钙离子载体A23187都是液体的早期胚胎培养的发育培养基也是液体的。

2、技术手段不同，植物细胞工程的手段有植物组织培养、植物体细胞杂交等，动物细胞工程的手段有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、核移植、胚胎移植、胚胎分割等。

3、采用无血清培养基培养杂交瘤细胞制备单克隆抗体，便于抗体纯化，有利于规模化、标准化生产，同时降低细胞污染的概率。但无血清培养的细胞新陈代谢较弱，同时无血清培养基缺乏血清中保护细胞免受环境机械损伤的细胞因子等。