本篇目录:
- 1、流式细胞术怎么调节荧光补偿FITC/PE/PerCP/APC
- 2、foxp3染色问题求助
- 3、怎么选择各公司的流式抗体?
- 4、调查:大家用的一般是什么牌子的流式抗体
- 5、大家常用的ELISA试剂盒是哪个牌子的,效果怎么样?
流式细胞术怎么调节荧光补偿FITC/PE/PerCP/APC
调节电压后,阴性的细胞位于左下象限。这是可以得出阴性细胞横坐标(PE)和纵坐标(FITC)的平均荧光强度值。电压调好以后,上单色阳性样本。
如果目标Marker较少, 比如三色、四色等,应尽量选择单体染料(例如:FITC、PE、APC等)。 如果 检测Marker较多, 或者流式细胞仪激光器受限,串联染料(PE/CyaninePerCP/Cyanine5等)的使用,是非常有必要的。
先上未染色的细胞作为空白对照,以调节各个荧光通道的电压;然后单染管上样,比如上样FITC单染管,发现细胞群会飘到PE和percp-cy5通道里,会出现在双阳区域Q2。调节补偿的原则:上谁的单染管就减去谁的通道里的光。
PerCP的最大发射波长为677nm。在流式细胞仪的FL3通道检测。一般四种颜色或以下的比较好选,常用:FITC,PE,APC,Percp-cy5。界面有点不同,但基本原理就是设置好你需要集中颜色,用的是哪台仪器,几根激光。。
foxp3染色问题求助
Foxp3的染色是核染色,最好卖现成的试剂,比如BD,biolegend流式抗体 · eBioscience流式抗体中一般都带有相应的破核试剂。
此问题要依据具体情况而定,缓冲液的选择要根据Anti-BrdU 抗体的荧光标记来选择,除了eFluor 450,在Anti-BrdU antibodies说明书中都提供了用Foxp3/Transcription Factor Staining Buffer Set进行染色的方案。
precipitate sonicated chromatin 沉淀经超声处理的染色质 precipitate作动词,表示使...沉淀下来 TSA cells transfected with the Foxp3-V5 cDNA 翻译成Foxp3-V5 cDNA转染的TSA 细胞,正确。
怎么选择各公司的流式抗体?
1、第三荧光的颜色选择一是你的流式仪一定要能读,二是跟你需要counterstain的其他流式抗体错开频率。第四抗体的球蛋白亚型。因为要根据这个选择isotype对照用抗体。
2、abcam、Sigma、cst 的抗体都不错,但是价格相对贵些,而且抗体的量比较少,Santa的抗体量比较多,但是质量不稳定,要碰运气。国产的话相对就便宜很多,推荐万 类生物,试用过他家很多抗体,条带都出的不错。
3、eBioscience的抗体挺好用的,就是到货时间比较慢。
调查:大家用的一般是什么牌子的流式抗体
1、流式细胞仪有哪些激光。比如标配的FACSCalibur只有一根488nm的激光,能做FLFLFL3三个荧光通道/三个颜色,而选配的Calibur (FACSCalibur的简称)配有488nm和635nm两根激光,可以检测FL1-FL4四个通道/4个颜色。
2、第二抗体的物种是小鼠,大鼠,兔子还是什么。虽然现在荧光都标记好了,一般不需要二抗。但最好还是选择你有匹配二抗的一抗,以备不时之需。如果抗体还能够做荧光染色啊,western blot啊用途多了更好。
3、推荐您选择贝克曼库尔特品牌的细胞分选仪,细胞分选仪拥有小巧、智能的优越特性,同时拥有卓越的性能与简单的操作,用科技与创新,将分选化繁为简,使得分选更加轻松与准确,让科研工作者更加专注于科学研究本身。
4、,覆盖欧美的全球采购中心,总部设立在美国新泽西,采购团队有30多人,能进口涵盖抗体,蛋白,细胞,血清,耗材等的全门类生物产品。
5、你师姐用来做流式,是用直接标记,还是间接标记?如果是直接标记的话,那这个抗体一般不是FITC标记或者就是TRITC,PE之类的。如果恰好你的免疫组化,也是想用荧光素标记的抗体来直接标记,那就可以通用。
6、使用流式细胞仪进行检测用的抗体,一般是抗体和荧光的偶联物。
大家常用的ELISA试剂盒是哪个牌子的,效果怎么样?
OUSAID欧塞德、联科、欣博盛几个品牌都使用过,这三个品牌国内还算比较不错吧。我们组没有很多经费,不能选择进口的牌子,所以国产的这三个品牌混着都买了一些,效果都还不错。
elisa试剂盒的质量的好坏影响着实验的成功与否,当然了,实验环境、操作的程序等都有很大影响,就看你怎么选择和操作了。
选择elisa试剂盒的时候,需要考虑灵敏度是否高,数据是否准确,操作是否简单等方面的问题,此外,也要考虑你们实验的经费,合理选择试剂盒。在elisa试剂盒方面,武汉福来生物工程有限公司的还不错。