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改造鼠源性单克隆抗体的目的
1、鼠McAb的人源化,就是为克服鼠源McAb的免疫原性而将其进行改造,使之和人体内的抗体分子具有极其相似的轮廓(profile),从而逃避人免疫系统的识别,避免诱导HAMA反应。
2、二是通过抗体库的构建,使得抗体不需抗原免疫即可筛选并克隆新的单克隆抗体。
3、人-鼠嵌合抗体:利用DNA重组技术将鼠源单抗的轻链、重链可变区插入含有人抗体恒定区的表达载体中,转化哺乳动物细胞进行表达所产生的单克隆抗体(图1)。
4、使动物表达人类抗体,达到抗体全人源化的目的。目前,已建立多种方法生产完全人源性抗体,主要有噬菌体展示技术、转基因小鼠技术、核糖体展示技术和RNA-多肽融合技术。
5、单克隆抗体是一种针对特定抗原表位的抗体。该抗体主要由具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞分泌。这种细胞需要与具有大量繁殖能力的骨髓瘤细胞融合,这样不仅能保留抗体的分泌能力,而且能达到大规模繁殖的目的。
6、抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏B淋巴细胞。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均仅针对某一特定抗原表位的抗体。
基因工程抗体有哪三种类型
1、重组抗体,也称为基因工程抗体,是指通过DNA重组技术将抗体相应的基因序列根据需要进行改造和重组,并构建在质粒上,再通过蛋白外源表达技术将构建好的质粒转染/转化入适合的宿主细胞表达获得的抗体。
2、也称为第三代抗体。基因工程抗体包括嵌合抗体、重构抗体、单链抗体、单区抗体及抗体库等。其中以嵌合抗体研究的较多,也较成熟。单链抗体及单区抗体虽具有结构简单、分子小等优点但其临床应用的前景尚待证实。
3、第三节 基因工程抗体制备技术 基因工程抗体:通过基因工程的手段,按照个人意愿进行细胞人工改造的技术。 优点主要有:特异性高、质量稳定、成本低廉、工艺简单、异源性滴低、穿透性好、功能丰富。
4、基因工程抗体技术 随着DNA重组技术的发展,人们开始用基因工程的方法制备部分或全人源化的基因工程抗体(Genetic engineering antibody),如人-鼠嵌合抗体、改型抗体、双特异性抗体、小分子抗体等。
5、嵌合抗体主要有三种类型:嵌合IgG抗体 目前嵌合抗体的研究主要集中在嵌合IgG(Immunoglobulin G)抗体。
抗单链DNA抗体简介
可分为单链(变性)和双链(天然)DNA抗体:(1)抗单链DNA(ssDNA)抗体:在多种疾病中及正常人血清中存在,无特异性,临床价值不大。
参与SLE发病的主要抗体。抗双链单链组合是针对其中双链DNA的一种自身抗体,其意思是参与SLE发病的主要抗体。抗双链单链组合是脱氧核糖核酸,其分为双链DNA(dsDNA)和单链DNA(ssDNA)两种。
抗单链DNA(ssDNA)抗体:在多种疾病中及正常人血清中存在,无特异性,临床价值不大。提示可能有自身免疫病,可以到医院风湿科去咨询一下。一般来说跟手术没有关系的。
抗双链DNA抗体是完全可以转为阴性的。系统性红斑狼疮患者在体内会存在大量的自身抗体,以抗核抗体为代表,还会包括其他抗体,抗双链DNA抗体只是其中的一种而已,另外也会出现抗U1RNP或者抗SS-A抗体等多种抗体。
.单链抗体 是将Ig的H链和L链的V区基因相连,转染大肠杆菌表达的抗体分子,又称单链FV( single chain fragment of variable region,sFv )。SFv 穿透力强,易于进入局部组织发挥作用。
抗单链DNA抗体又称为变性DNA抗体,该抗体在多种疾病及正常人血清中存在,临床诊断价值不大。而抗双链DNA抗体又称为天然DNA抗体,测定这种抗体非常重要,主要有以下几方面的意义。
为什么要对鼠源性单克隆抗体进行改造使之人源化,改造的方法有哪些
1、该策略的原则是确定鼠源抗体表面残基的位置,在维持抗体活性并兼顾减少抗体免疫原性的基础上,选用与人源抗体表面残基相似的氨基酸进行替换。通过这种方法人源化的抗体通常表现出稳定性和亲和力的变化很小。
2、改造鼠源性单克隆抗体的目的是降低分子量。根据查询相关公开信息,改造鼠源性单克隆抗体的首要目的是降低分子量。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均仅针对某一特定抗原表位的抗体。
3、对于其他类型的人源化抗体,其优势在于,技术路线简单,易于操作;抗体完整性好,在体内滞留时间长;鼠源抗体的亲和力和特异性都得到保留,在临床上得到了良好的反应。
4、小鼠的单克隆抗体是属于鼠源性的,如果直接用于人体,人的机体免疫会有严重的排斥反应,从而引起不良反应,甚至死亡,所以非人源化得抗体是不能直接用于人体的。
5、基因工程抗体:通过基因工程的手段,按照个人意愿进行细胞人工改造的技术。 优点主要有:特异性高、质量稳定、成本低廉、工艺简单、异源性滴低、穿透性好、功能丰富。
6、B 人源化抗体是用基因工程技术尽量减少鼠源单克隆抗体中非Ⅴ区的鼠源成分而创造出的一种新型抗体。如人-鼠嵌合抗体,是通过基因拼接技术将人IgG-C区的DNA片段与鼠IgG-Ⅴ区的DNA拼接后,导入细胞内表达制备而成的抗体。