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蛋白表达不同检测方式的比较和分析
1、蛋白表达水平的检测方法有多种，常用的几种包括：免疫印迹法（WB）：通过将蛋白质样品进行电泳分离，然后将其转移到膜上，并利用特异性抗体与目标蛋白结合形成复合物，最后使用化学发光或染色方法检测复合物的存在和相对丰度。
2、免疫组化和elisa所用到的原理大致相同，只是因为所检测的样品不同，从而在操作方法上有所不同。Elisa多用于定量分析，其灵敏度非常高。
3、IHC通常使用染色强度评估目标蛋白质的表达水平，可以通过光密度分析或图像分析进行定量。WB可以通过荧光信号、化学发光或酶反应等方法进行信号测定，并通过光密度分析或相对波段密度来定量目标蛋白质的表达水平。
4、蛋白质表达水平检测 在基因表达调控研究中，蛋白质表达水平的变化是重要的研究内容。通过蛋白质检测技术，可以了解特定基因在不同条件下的表达情况，进而分析基因表达调控的机制。
5、优点：测定速度较快，干扰物质少，不同蛋白质产生的颜色深浅相近。缺点：①灵敏度差；②三羟甲基氨基甲烷、一些氨基酸和EDTA等会干扰该反应。
免疫标记技术标记物-2020医疗卫生检验学
在临床免疫学检验中有很多的检测方式，其中最重要的一大类就是免疫标记技术。免疫标记技术指用荧光素、酶、放射性同位素或电子致密物质等标记抗原或抗体进行的抗原抗体反应。
酶标抗体制备常用二醛法及过碘酸盐法。RIA(放免)核素标记抗原，竞争抑制，2-3个数量级，标记物限量。IRMA(免疫放射)核素标记抗体，非竞争结合，3个数量级以上，标记物过量。
IgG：①是血清中含量最高的免疫球蛋白；②是血液和细胞外液中的主要抗体，也是机体再次免疫应答的主要抗体；③是唯一能通过胎盘的免疫球蛋白；④具有抗菌、抗病毒和抗毒素作用。IgA：①分两种亚型，血清型和分泌型。
免疫三大标记技术是
荧光抗体技术、放射免疫分析和酶免疫技术，即经典的三大标记技术，又可根据标记物是否为放射性物质分为放射性免疫测定和非放射性免疫测定两大类。
免疫标记技术有三种基本类型：免疫荧光 法、免疫酶技术和放射免疫技术。常用的标记物有荧光素、酶、放射性核素及胶体金等。免疫标记技术具有快速、定性或定量甚至定位的特点，是应用最广泛的免疫学检测技术。
常用的标记物包括荧光素、酶和放射性核素等，用这3种标记物进行标记的免疫检测技术被称为3大免疫标记技术。目前使用的免疫标记物还有化学发光物质、铁蛋白和胶体等。
主要有5类：①放射免疫技术；②免疫荧光技术；③酶免疫技术；④化学发光技术；⑤电化学发光技术。
荧光抗体技术。利用荧光抗体发出的荧光 放射免疫分析。利用放射性核素标记 酶免疫技术 。
蛋白质的印迹分析（Western blotting）与Southern或 Northern杂交方法类似，但Western采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色用标记的二抗，该检测技术往往需要抗体。
IRMA与RIA的异同点。
IRMA和RIA的本质区别：RIA为竞争抑制性反应，反应参数与待检抗原量成反比；IRMA为非竞争性反应，反应参数与待检抗原浓度呈正相关。
应用不同：在RIA中应用的多为克隆抗体，亲和力和特异性要求较高，但用量很少。IRMA中标记抗体和固相抗体用量较多，一般均用来源丰富、特异性较高的单克隆抗体。
RIA（radioimmunoassay，放射免疫分析）是以放射性核素为标记物的标记免疫分析法，用于定量测定受检标本中的抗原。
