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单克隆抗体技术的原理、基本过程、意义及应用。
1、单克隆抗体的应用:作为亲合层析的配体;作为生物治疗的导向武器;作为免疫抑制剂;作为研究工作中的探针;增强抗原的免疫原性。
2、这种技术即称为单克隆抗体技术。过程 1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。
3、例如,可以利用单克隆抗体分离或检测特定的分子,帮助研究者深入理解生命现象,揭示疾病的发生机制。单克隆抗体的发展前景单克隆抗体技术的发展前景十分广阔。
4、单克隆抗体的原理:就是细胞膜的流动性,以及细胞核的全能性。
5、所以制备单克隆抗体的技术又称杂交瘤技术(hybredoma technique)。基本原理 其原理是:B淋巴细胞能够产生抗体, 但在体外不能进行无限分裂; 而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代, 但不能产生抗体。
单克隆抗体怎样提纯?杂交瘤细胞属于癌细胞的一种??
进行体内或体外培养。体内培养就是将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔,将来从腹水中提取。
用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体,即单克隆抗体。单克隆抗体是人工制备的杂交瘤细胞生产的,杂交瘤细胞是由一个经抗原激活后的B细胞与一个骨髓瘤细胞融合形成。
缺点就是生成的抗体只针对1种抗原决定簇,比较单一。基本过程:抗原的处理在小鼠体内植入抗原(免疫)取免疫鼠的B淋巴细胞与鼠的骨髓瘤细胞用PEG细胞融合在多孔板上筛选。
目前最有效的单克隆抗体纯化方法是
【答案】:E 目前最有效的单克隆抗体纯化方法为亲和层析法,其具有选择性高、所得抗体纯度高、回收率高等优点。因此,本题最佳答案是E。
以下是几个常用的基于渐进式纯化的单克隆抗体提纯方法:亲和层析:利用抗体特异性识别作用分离抗体。通常会使用吸附剂,例如蛋白A、蛋白G或蛋白L等针对抗体常见的重、轻链、Fc区等部位进行亲和层析。
筛选:通过将杂交瘤细胞置于选择性培养基中,筛选出能够产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞。扩增:将筛选出的单克隆抗体杂交瘤细胞扩增并收集其上清液。纯化:利用蛋白A/G亲和层析等技术对单克隆抗体进行纯化和富集。
制备单克隆抗体的方法制备单克隆抗体的方法通常包括以下几个步骤:首先,通过免疫动物(如鼠、兔)注射目标抗原,激发其免疫系统产生多种抗体。
终次筛选的方法和目的:方法:通常采用流式细胞术(流式细胞仪)或细胞融合技术进行终次筛选。目的:终次筛选的目的是进一步筛选出具有更高亲和力和特异性的单克隆抗体。
【答案】:E 单克隆抗体经初步处理后,再按所要求的纯度不同采用相应的纯化方法,一般采用盐析、凝胶过滤、离子交换层析和辛酸提取等方法。