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双抗体夹心法的特点
1、双抗体夹心法的优缺点:优点:高特异性,使用的捕获抗体与检测抗体都是检测特异性的;适用于复杂样品,抗原不需要进行纯化即可用于检测;灵活性更大,灵敏度更高,可采用直接法也可采用间接法。
2、灵敏度:直接法的灵敏度比间接法高,因为直接法中检测到的目标抗原分子已经被检测抗体所夹持,因此更容易被检测到。
3、双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:(1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。
4、这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物。
ELISA双抗体夹心法原理是什么?
1、连接于固相载体上的抗体和酶标抗体,与待检抗原上两个不同的抗原决定基结合,形成固相抗体一抗原一酶标抗体复合物。
2、elisa实验原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面,加入待检标本,通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少。
3、双抗体夹心法的原理是利用连接于固相载体上的抗体(未标记)和酶标抗体可分别与样品中被检测抗原分子上2个不同抗原表位结合,形成固相抗体和酶标抗体免疫复合物。
4、双抗体夹心法:①:抗体包被 在96孔板上包被抗体。由于酶标板是由聚苯乙烯制成,其含有的苯环与抗体的氨基酸残基具有类似π-π堆积作用的引力,结合静电和疏水作用,可以将抗体吸附于其表面。
双抗体夹心法检测乙肝病毒表面抗原的意义
1、乙肝表面抗原检查用于判断是否感染了乙肝病毒。 乙肝表面抗原阳性是感染乙肝病毒的指标,乙肝表面抗原本身具有抗原性,无传染性。 其他肝功能正常而仅仅乙肝表面抗原阳性者,称为乙肝病毒携带者。
2、乙肝表面抗原(HBsAg)是乙肝病毒的外壳蛋白,本身不具有传染性,但它的出现常伴随乙肝病毒的存在,所以它是已感染乙肝病毒的标志。
3、(2)乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)简称表面抗体,其为阳性说明乙型肝炎进入恢复期,是好转的表现。因此表面抗体是保护性抗体,能保护人体不再受乙肝病毒的感染。
4、临床意义 乙肝核心抗体(HBcAb)是乙肝病毒核心抗原的对应抗体,它不是保护性抗体,它的存在反而是受到乙肝病毒侵害的指标之一。它包括IgM、IgA、IgG三种类型。