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简述测定抗体的间接ELISA抗体
间接ELISA 反应过程:先将被检测的抗原加到已涂有抗原的孔中,再加入未标记的特异性抗体与之结合,再加入与该次结合相应标记的二抗与上一步结合。
ELISA可用于测定抗原,也可以测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检验方法。
间接竞争ELISA在间接ELISA的基础上进行了一些修改,用于检测样品中特定抗原的存在量。具体步骤包括:将抗原溶液加到固相载体上,使其吸附。
包被抗原后加入待测抗体,反应后洗板,加入酶标二抗,反应后再洗板,加入底物显色。间接Elisa方法主要用来检测抗体,例如我们对动物进行免疫后要检测抗血清的效价的话,就可以用间接Elisa方法来测。
间接法常用于检测抗体,将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原,重复两次。洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器测定塑胶盘中的吸光值,以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。
类型 有直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA、抗体夹心ELISA等多种类型。
关于间接竞争ELISA法
Elisa法有间接ELISA和直接ELISA两种类型。其中,直接ELISA又分为竞争ELISA和非竞争ELISA两种。其原理均基于抗体与其对应的抗原之间的特异性结合,利用这一结合来检测样品中是否含有特定的抗原。
直接竞争ELISA和间接竞争ELISA区别 直接竞争,标记抗原,与检测样品中的抗原竞争抗体。 间接竞争,标记抗体,固相抗原与液相抗原(样品)竞争标记抗体。 定义间接竞争法的模型:包被抗原,用HRP-抗体与样本一起加入。
elisa的四种方法类型分别是夹心法、竞争法、间接法、捕获法。资料拓展 elisa是一个专有名词,的意思是酶联反应。酶联反应的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
标记抗体具有通用性的ELISA为
1、【答案】:E 间接法主要用于检测抗体,包括病原体抗体或自身抗体。不论哪一种抗体,它们均具有同种型抗原表位,这种表位具有种属特异性,但种属内是相同的。因此,间接法的标记抗体在同一种属内具有通用性。
2、elisa的四种方法类型分别是夹心法、竞争法、间接法、捕获法。资料拓展 elisa是一个专有名词,的意思是酶联反应。酶联反应的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
3、elisa即 enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA),是一种常用的免疫分析方法,适用于检测特定蛋白质或抗原的含量。
4、间接ELISA 反应过程:先将被检测的抗原加到已涂有抗原的孔中,再加入未标记的特异性抗体与之结合,再加入与该次结合相应标记的二抗与上一步结合。
为什么间接法elisa不能直接用酶标记
1、ELISA实验所有方法的缺点很明显:重复性不好;收自身抗体、嗜异性抗体等干扰,易出现假阳性;不论仪器和手工操作,干扰因素较多。影响最大的是温度和时间。
2、\x0d\x0a缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。
3、系统放大不同 在进行系统放大时,间接竞争法一般可以使用酶标二抗。因为二抗可以针对抗体的多个部位,所以存在放大效应,从而能提高间接法的灵敏度。
4、间接法常用于检测抗体,将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原,重复两次。洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器测定塑胶盘中的吸光值,以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。
5、间接法(indirect ELISA)此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。
elisa的四种方法类型分别是
1、elisa的四种方法类型分别是夹心法、竞争法、间接法、捕获法。资料拓展 elisa是一个专有名词,的意思是酶联反应。酶联反应的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
2、ELISA实验所有方法的缺点很明显:重复性不好;收自身抗体、嗜异性抗体等干扰,易出现假阳性;不论仪器和手工操作,干扰因素较多。影响最大的是温度和时间。
3、类型 夹心法常用于检测大分子抗原,将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体,重复两次,洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果。
4、双抗体夹心法 该方法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
5、灵敏度可达皮克(pg/mL)水平。它是目前商业应用最为成熟的免疫分析方法之一,在医学实验、临床诊断、生物制药方面的运用也极为广泛。目前,常见的ELISA类型有四种:双抗夹心法、直接法、间接法和竞争法。