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荧光定量机器原理
1、所谓real-time Q-PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基因，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
2、当有入射光照射物质时，其分子会吸收入射光的能量从而受到激发使得其电子由低能级跃迁至高能级，此时处于激发态的分子其结构并不稳定，会通过跃迁而失去能量返回基态，这个过程会伴随着荧光或者磷光的产生。
3、基本原理 qPCR技术基于PCR技术，但是在PCR的基础上加入了荧光染料和检测系统。PCR是一种体外扩增DNA的技术，它通过反复复制DNA模板，使其数量呈指数级增长。
杂交显色点是什么意思
室温下，于 70%、85% 和 100% 乙醇中各 2 min 脱水，空气干燥。变性和杂交 将足够的探针，如 10uL 加到组织切片上，适于 22 mmX22 mm 的盖玻片范围大小。将盖玻片盖到切片上，用橡皮泥封边。
杂交缓冲液问题：杂交缓冲液中的成分或浓度有问题，也会导致空白显色。
免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性 抗体 在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定位、定性、半定量测定的一项新技术。
一般的点印迹杂交是靶DNA固定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上，标记的探针和靶DNA杂交显色。
斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜（或尼龙膜、NC膜）上，用已标记的探针进行杂交，洗膜（除去未接合的探针），放射自显影，判断是否有杂交及其杂交强度，主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。
RNA原位杂交中需要的地高辛抗体要用什么标记的?
1、我们这儿所介绍的一种原位杂交的方法是通过后者，以地高辛标记探针，然后用酶联抗体的方法进行检测。
2、(1)半抗原：生物素(biotin)和地高辛(DIG)都是半抗原，可以利用这些半抗原的抗体进行免疫学检测，根据显色反应检测杂交信号。这两种物质是目前使用较普遍的非核素标记物。
3、非同位素标记物中目前最常用的有生物素、地高辛和荧光素三种。按核酸不同性质，探针又可分为DNA探针、cDNA探针、cRNA探针和合成寡核苷酸探针。cDNA探针又可分为双链cDNA探针和单链cDNA探针。
4、RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交。该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。
细胞凋亡的免疫学检测方法有哪几种(注意是免疫学的方法)
1、而流式细胞术是非常重要的检测细胞凋亡的方法，不仅可以定性，也可以定量。流式细胞术检测细胞凋亡的方法也有很多，其中最重要是annexinV/PI双染色法。
2、流式检测细胞凋亡的原理 Annexin V和PI双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法 ，它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine， PS）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的（如下图3）。
3、用流式细胞仪或荧光显微镜直接观察PS外翻这一细胞凋亡的重要特征，是一种快速简便的细胞凋亡经典检方法。操作方法：染色液的配制：1) 取适量4x Annexin V结合液，用双蒸水稀释至1xAnnexin V结合液。
