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elisa六种方法类型及原理
elisa实验原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待检标本，通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少。
间接ELISA 反应过程：先将被检测的抗原加到已涂有抗原的孔中，再加入未标记的特异性抗体与之结合，再加入与该次结合相应标记的二抗与上一步结合。
用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型：（一） 双抗体夹心法测抗原 双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：（1）将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。
分类：根据免疫识别和信号输出方式的不同，ELISA可以分为双抗体夹心法、直接免疫竞争法和非直接免疫竞争法等等。其中双抗体夹心法在商业应用上最常见。双抗体夹心法：①：抗体包被 在96孔板上包被抗体。
ELISA实验的原理基于抗原与抗体的特异性结合、酶标记技术和底物反应等步骤，通过测量产生的信号强度来定量分析和检测目标物质的存在量。不同类型的ELISA实验可以根据实验设计和样品特点选择合适的方法，以满足不同的研究需求。
免疫分析方法有哪些?
（4）化学发光免疫分析法（luminescentimmunoassay，LCIA）。LCIA又可分为化学发光免疫测定（chemiluminescentimmunoassay，CLCIA）和生物发光免疫测定（bio-luminescentImmunoassay，BLCIA）。
化学发光免疫分析，是用化学发光剂直接标记抗体或抗原的一类免疫测定方法。目前常见的标记物主要为鲁米诺类和吖啶酯类化学发光剂。
酶免疫分析、荧光免疫分析、化学发光分析、时间分辨分析及电化学发光分析等。
该免疫分析技术有两种方法：一是小分子抗原物质的测定采用竞争法；二是大分子的抗原物质测定采用双抗体夹心法。
免疫诊断包括哪些方面免疫诊断主要通过抗原抗体结合反应测定人体内物质。
抗体特异性的鉴定
若抗血清与粗抗原及纯化抗原之间皆出现一条沉淀线，且两条线融合，则证明动物已产生单价特异抗体。若不出现沉淀线表明动物免疫未获成功。
单向免疫扩散常用于待测抗原的定量测定；亲和层析和免疫吸附是分离纯化的方法；可以用特异性抗原与制备的抗血清进行双向免疫扩散试验来鉴定抗血清的特异性。
该鉴定是检查ABO血型系统和Rh血型系统。该鉴定主要是用于检查血型，能够判断是否存在ABO血型不合溶血的情况，从而预防新生儿溶血症、新生儿黄疸等疾病。
血型单特异性抗体鉴定主要是查胎儿溶血风险。血型单特异性抗体鉴定是一种检测孕妇血清中是否存在特定抗体的方法。这些抗体通常是由于孕妇与胎儿的血型不匹配而产生的。
单克隆抗体定性和分型鉴定的首选方法是
1、单克隆抗体性质鉴定有放免测定、ELISA等方法，最常用的是ELISA。
2、方法：通常采用流式细胞术（流式细胞仪）或细胞融合技术进行终次筛选。目的：终次筛选的目的是进一步筛选出具有更高亲和力和特异性的单克隆抗体。
3、除了前两种检测手段外，还有一种使用不太多，但同样重要的检测方法，就是同属免疫测定方法的「血清抗体检测」。
4、以下是几个常用的基于渐进式纯化的单克隆抗体提纯方法：亲和层析：利用抗体特异性识别作用分离抗体。通常会使用吸附剂，例如蛋白A、蛋白G或蛋白L等针对抗体常见的重、轻链、Fc区等部位进行亲和层析。
5、当抗原和抗体向四周凝胶中扩散，在两孔间可出现2～3条沉淀线，本法常用于抗原或抗体的定性或定量检测，或用于两种抗原材料的抗原相关性分析。
6、单克隆性丙种球蛋白是由单克隆抗体的浆细胞大量增生产生的异常免疫球蛋白，其本质是一种免疫球蛋白或免疫球蛋白的片段，其又称“M蛋白”。M蛋白多出现在多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤等疾病。
抗体检测的方法
1、(一)玻片凝集试验 玻片凝集试验为定性试验方法，一般用已知抗体作为诊断血清、与受检颗粒抗原如菌液或红细胞悬液各加一滴在玻片上，混匀，数分钟后即可用肉眼观察凝集结果，出现颗粒凝集的为阳性反应。
2、在《抗体工程》上有亲和力常数的测定方法，如平衡透析、竞争结合、荧光增强法、硫氰酸盐洗脱法、ELISA和固相放射免疫测定法（SPRIA）等。其中ELISA和SPRIA是最敏感的检测方法。通常采用竞争结合以及Scatchard作图法。
3、【答案】：A ELISA中竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体；间接法是检测抗体最常用的方法；双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法；捕获法用于检测IgM抗体。
4、抗核抗体检测 抗核抗体是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称，主要是IgG，其次是IgM和IgA，无器官和种属特异性。ANA在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性，正常老年人也可有低滴度的ANA。
5、由于一步法中固相抗体和酶结合物抗体与待测抗原的反应速率不同，待测抗原含量过高时，容易与酶结合物抗体反应而未能与固相抗体反应，从而导致“钩状效应”。竞争法主要用于小分子测定或半抗原测定。
6、对运动员进行服用违禁药品的检测，都是应用半抗原检测的方法。 抗原或抗体检测的方法 由于各种检测方法中所用的抗原性状不同，出现结果的现象也不同。
