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多肽合成方法有哪些
1、如果严格按照以上的反应条件，混合酸酐法很容易进行，是最有效的缩合方法之一。对称酸酐法 Nα－酰基氨基酸的对称酸酐是用于肽键形成的高活性中间体。与混合酸酐法相反，它与胺亲核试剂的反应没有模棱两可的区域选择性。
2、固相合成法、液相合成法用这种方法生产肽的企业在美国硅谷就有一家。他们主要是购买世界上一些精细化工厂生产的氨基酸为原料定向合成某种单肽，属医药原料中间体，主要用于西药配方，以增强药效、增强人体对药的吸收速度和吸收率。
3、Boc多肽合成法 Boc方法是经典的多肽固相合成法，以Boc作为氨基酸α-氨基的保护基，苄醇类作为侧链保护基，Boc的脱除通常采用三氟乙酸(TFA)进行。
亲和层析技术在生物科学中的应用及发展:荣捷生物层析
1、摘要：近几十年来，亲和层析技术发展十分迅速，广泛应用于生物分子(如结合蛋白、酶、抑制剂、抗原、抗体、激素、激素受体、糖蛋白、核酸及多糖类等)及组织(如细胞、细胞器、病毒等)的分离和纯化，是蛋白质组学研究中重要的技术之一。
2、亲和层析是一种吸附层析，抗原（或抗体）和相应的抗体（或抗原）发生特异性结合，而这种结合在一定的条件下又是可逆的。
3、方法：将某一类细胞中所有的蛋白质过含有该类细胞各种片段的DNA层析柱，用低浓度盐溶液洗去不与DNA作用的绝大多数蛋白，用中浓度盐溶液洗脱大部分与能DNA相互作用的蛋白。
4、色谱分析(chromatographic analysis)是20世纪发展起来的一种有效的分析和分离技术，也称为色层分析，简称为层析。层析法是俄国植物学家茨维特(Tswett)在20世纪初发明的。
抗体纯化的原则是什么?
抗体纯化主要是根据类型和要求来纯化。比如单克隆抗体，过一下A蛋白或者G蛋白柱就是足够的纯了。分离提纯后的物质状态不变。实验过程和操作方法简单易行。即选择分离提纯方法应遵循先物理后化学，先简单后复杂的原则。
抗体偶联物纯化试剂盒原理如下：提取对某种特定抗原的特异性抗体，这种特抗体可以是几类免疫球蛋白的混合物；将(固定化的)抗原-杭体复合物解离，收集其流出液，便可以得到已纯化的抗体。
抗体纯化 亲和层析法：该方法利用抗体与其对应的抗原之间的特异性结合来纯化目标抗体。通常将抗原固定在固相上，然后加入混合的抗体样品，抗体会与抗原结合并附着在固相上，其他非特异性成分则通过洗涤步骤去除。
抗体能用反相纯化是一种基于化学亲和性的色谱技术，通过调节溶剂的极性来实现样品的分离纯化。
多克隆抗体制备的原理 抗体制备、动物免疫、抗体纯化 多抗的基本条件 免疫原的制备 颗粒性抗原：细胞、病毒、细菌等，一般具有较强的免疫原性，可以不加佐剂，直接进行腹腔注射。
不能溶解的多肽怎么纯化
1、对多肽纯化常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。
2、纯化前用Buffer A溶解；如果溶解不好，用Buffer B溶解后，然后用Buffer A稀释；对疏水性强的多肽，有时还需要加入少量的Formic Acid或醋酸。
3、可先尝试用蒸馏水来溶解；如果不溶于水，接着尝试用少量10%-25%醋酸溶解，如果仍然失败的话，添加一些TFA(10-50微升)来增溶，然后用水稀释至理想浓度。 如果整段肽所带电荷是阴性的，说明该肽是酸性的。
4、是一种分离技术。多肽纯化平台是一种用于纯化多肽的分离技术，它可以帮助使用者分离出不同来源、不同特性的多肽。
5、用水溶解；如果不溶解或溶解性不大，加入氨水(25ul)溶解，然后加入500ul水稀释。(4)如果净电荷数=0，多肽为中性，一般需要用有机溶剂如乙腈，甲醇或异丙醇，DMSO等溶解。还有人建议需要尿素来溶解疏水性很大的多肽。
6、缩合即是将已备好的激活氨基酸接起来。这是多肽合成的关键步骤，该步骤中，已活化的羧基与下一个保护的氨基酸的氨基在碱催化下进行缩合反应。然后可以将保护基离去以及使产生的粗品经过纯化，多肽链随之不断增长。
多肽纯化的方法有哪些?
1、纯化前用Buffer A溶解；如果溶解不好，用Buffer B溶解后，然后用Buffer A稀释；对疏水性强的多肽，有时还需要加入少量的Formic Acid或醋酸。
2、可以复性的。粗提后一般通过高效液相进行纯化。landy培养基是一种培养芽孢的培养基。
3、多肽的分离纯化，一般有固定的思路。比如固相合成的多肽一般采用，XD7HP树脂脱酸（THF），然后SKP-10-1300层析填料层析纯化，纯度99%以上，然后脱酸脱盐冻干就行了，如果纯化不到想要的纯度在想其他办法，不过一般没有问题。
