抗体制备技术的app,抗体制备一般流程

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1、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤：制备抗原。选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试，看看是否成功免疫。如果成功免疫，杀死实验动物，采集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。

2、早年人工制备抗体的方法主要是以相应抗原免疫动物，获得抗血清。由于抗原常常含有多种不同的抗原表位，加之所获得的抗血清也未经免疫纯化，因此，获得的抗血清实际上是含多种抗体的混合物，即多克隆抗体(polyclonal antibody)。

3、家兔是最常用以产生抗体的动物，因此这里主要讨论兔血的收集。羊等较大动物以颈静脉、动脉取血，鼠等小动物取血可参阅有关资料。取兔血有两种方法，一是耳缘静脉或耳动脉放血，一是颈动脉入血，也可心脏采血。

1、②多克隆抗体的制备：将抗原免疫动物（常用的动物为兔、羊、狗等），分离出抗血清并纯化抗体。多克隆抗体的均一性较差，其特异性相对较低，因此，多克隆抗体在农药残留速测技术中的应用受到一定的限制。

2、单克隆抗体的大量制备一般采用动物体内诱生法和体外培养法。

3、单克隆抗体制备的过程通常包括两次筛选，分别是初次筛选和终次筛选。这两次筛选的目的是为了从大量的克隆细胞中筛选出具有高亲和力和特异性的单克隆抗体。

4、【答案】：基本原理：小鼠骨髓瘤细胞在体外适当条件下可无限增殖，但不能分泌抗体，而抗原免疫小鼠的脾细胞(B细胞)能产生抗体，但不能在体外无限增值。将两种细胞融合和就同时具有了无限增殖和分泌抗体的功能。

5、(2)将免疫B细胞与骨髓瘤细胞杂交，产生杂交瘤细胞，保持双方亲代细胞产生抗体与无限繁殖的特性。(3)利用代谢缺陷补救机制筛选出杂交瘤细胞，经有限稀释法，并进行克隆化，然后大量培养增殖，制备所需的各种单克隆抗体。

6、【答案】：经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌单一抗原表位的特异性抗体，是单克隆抗体。

1、（1）多克隆抗体的制备。①免疫方法：对多克隆抗体，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。

2、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤：制备抗原。选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试，看看是否成功免疫。如果成功免疫，杀死实验动物，采集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。

3、制备单克隆抗体常用的诱导剂有：化学诱导剂——聚乙二醇（PEG）、生物诱导剂——灭活的病毒（常用灭活的仙台病毒）。

4、制备兔源多克隆抗体的主要步骤包括：准备完全抗原。对兔子进行免疫。进行效价检测和终放。进行抗体亲和纯化。对抗体进行浓缩和保存。在免疫过程中，需要选择合适的佐剂和抗原，以产生良好的免疫反应。

5、用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原表位的特异性抗体，即单克隆抗体。单克隆抗体是人工制备的杂交瘤细胞生产的，杂交瘤细胞是由一个经抗原激活后的B细胞与一个骨髓瘤细胞融合形成。

1、单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。

2、④将选择细胞进行规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖(活体培养基)；⑤从细胞培养液或小鼠腹水中提取大量的单克隆抗体。单克隆抗体技术的重大意义在于可以用不纯的抗原分子制备特异性强、纯度高、均一性好的单克隆抗体。

3、抗体制备有两种方法。一是增量培养法，即将杂交瘤细胞在体外培养，在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备，一般应用无血清培养基，以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。最普遍采用的是小鼠腹腔接种法。

4、（一）脾细胞 1．材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2)1640培养液单克隆抗体制备流程 (3)5％FCS－1640营养液 2．操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。

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1、现用的免疫程序中多数是参照制备常规多克隆抗体的方法。表6-1列举了目前常用的免疫程序。免疫途径常用体内免疫法包括皮下注射、腹腔或静脉注射，也采用足垫、皮内、滴鼻或点眼。

2、这种技术即称为单克隆抗体技术。过程 1）免疫脾细胞的制备制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。

3、（1）显微操作法：在显微镜下取单细胞，然后进行单细胞培养。这种方法操作复杂，效率低，故不常用。

4、从培养液或腹腔积液获得的单克隆抗体，不需要纯化即可应用于日常诊断或定性研究。如果用于免疫标记测定，须分离和纯化。可用半饱和、饱和硫酸铵进行沉淀，进行初步浓缩和纯化；可用亲和层析法进一步纯化。