检测抗体的实验方法

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1、一抗是与底物相结合的，同时一抗必须有抗原识别位点，能被另一种抗体识别并结合。二抗是能与一抗的抗原识别位点识别并结合，同时，二抗必须有可以观测、计量的性质。

2、如果一抗为多克隆抗体，由于多克隆抗体主要是IgG类，因此相应的二抗应该选择抗IgG抗体。

3、一抗选择实验类型的种属，二抗选择种属来源。一抗确定你的实验类型，Elisa，WB，IHC，ICC，还是FACS，确定实验样本的种属，Human，Mouse，还是Rat。

4、抗体的选择作为western来讲，理论上单抗比多抗的特异性要好，但单抗种类较少一般价格偏高，所以一般来说多抗足够了。

二抗选择（1）种属来源。主要根据一抗种属来源而决定二抗来源，如一抗是小鼠来源，那二抗就买抗小鼠的即可（羊、兔等均可）。（2）标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。

源性一抗如果需要做共定位，那么就需要不同源性的且要能够用于人组织的，可以做组化的，二抗建议选择驴抗，这样用处多；如果说是做组织化学，那么一抗源性就无所谓了只要能用于人的组织，二抗相应配套就行。

鼠抗。二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如，一抗是小鼠的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗anti-mousesecondary。检查二抗说明书确保该抗体适用于自身的检测应用，二抗连接荧光素FITC或发光团。

1、试验中使用的方法有立即离心盐水试验法、低离子强度介质法(Liss)、酶试验法、抗球蛋白试验等等，可按抗体的血清学行为和试验的具体条件选择，但必须做抗球蛋白试验。

2、低离子介质法：此方法可以有效的用于检测不规则抗体(IgG性质)，此方法缺点是无法排除无临床意义抗体的干扰。

3、酶联免疫吸附实验（ELISA）是最常见的HIV抗体检测方法，它具有准确性高、价格低廉、判断结果有客观标准、结果便于记录和保存等优点，适合于大批量标本的检测，是献血员筛选和临床诊断最常用的方法。

4、ANA在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性，正常老年人也可有低滴度的ANA。ANA检测在临床自身免疫病诊断与鉴别诊断中是一个重要的筛查试验。

5、抗原抗体反应四大检测方法：放射免疫测定、间接血凝试验、免疫荧光技术、免疫酶技术。抗体是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。

6、对这类抗体的检测，女性的话，主要检查血清中与精子膜抗原发生反应的抗体，检测方法多用免疫珠法和MAR试验进行筛选，然后用精子制动化试验和体外受精阻断试验作进一步鉴定。

条件允许尽量选择进口，一抗abcam，Santa，CST等值得信赖，二抗的话国产的就行了。

（1）种属来源。主要根据一抗种属来源而决定二抗来源，如一抗是小鼠来源，那二抗就买抗小鼠的即可（羊、兔等均可）。（2）标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。

一抗是与底物相结合的，同时一抗必须有抗原识别位点，能被另一种抗体识别并结合。二抗是能与一抗的抗原识别位点识别并结合，同时，二抗必须有可以观测、计量的性质。

1、第三荧光的颜色选择一是你的流式仪一定要能读，二是跟你需要counterstain的其他流式抗体错开频率。第四抗体的球蛋白亚型。因为要根据这个选择isotype对照用抗体。

2、abcam、Sigma、cst 的抗体都不错，但是价格相对贵些，而且抗体的量比较少，Santa的抗体量比较多，但是质量不稳定，要碰运气。国产的话相对就便宜很多，推荐万类生物，试用过他家很多抗体，条带都出的不错。

3、eBioscience的抗体挺好用的，就是到货时间比较慢。

（1）确定抗体的名字，注意中英文名字、别名、亚型等信息。（2）确定您的实验类型，Elisa，WB，IHC，ICC，或者是FACS。

首先需要检查同型对照的抗体是否加错类型、剂量等。其次，因为有些标志在细胞的表面或者胞内表达不高，而跟其类似的抗原非常多，那么加入同型对照时，同型对照非特异性的结合会超过抗体的特异性，所以会造成这种现象，在细胞表面时如图所示。

HCV-RNA的检测及定量必须采用灵敏度高的试剂（最低检测限50 IU/ml）。目前COBAS高灵敏度HCV-RNA定量检测是公认的具有良好的准确性和重复性的HCV-RNA定量方法，是目前国内唯一满足治疗指南和专家共识的HCV-RNA检测项目。

【答案】：D 考点：免疫球蛋白测定方法的评价。[解析]速率散射比浊法是一种抗原-抗体结合反应的动态测定法，测定的是抗原抗体反应的第一阶段，其优点是快速、灵敏度高、结果准确可靠，可检测微量样品。

）选择灵敏度更高的表标记材料：胶体金是常用的标记物，但由于其具有较低的发光强度及较少的抗体吸附量，限制了胶体金免疫层析方法的灵敏度。

. 使用酶，后者发红色荧光、细胞免疫技术等..、激素.，金粒子还原银离子生成银颗粒而吸附在金颗粒周围呈黑褐色. 免疫学检测法准确性高。