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电泳还原与非还原区别
1、SDS-PAGE有非还原SDS-PAGE和还原SDS-PAGE之分，均是变性条件下的电泳。非还原与还原的区别是在样品处理时是否加入还原剂（如β-巯基乙醇或DTT等）。
2、SDS-PAGE本身就是还原的（就是变性胶），可以检测分子量，也可以做纯度检测，但不能定量，只能看出是否有杂蛋白；PAGE非是还原的（即非变性胶），也可以检测分子量和纯度，并且可以保持蛋白活性 再看看别人怎么说的。
3、根据样品分离目的不同，主要有三种处理方法：还原SDS处理、非还原SDS处理、带有烷基化作用的还原SDS处理。
4、从而把我们的蛋白质分子带上负电荷，可以电泳。有一点就是这是我们讲的还只是SDS。并没有讲到还原性。大家一定要注意这里的还原性不是指的是SDS的还原性。而是我们和SDS一起起作用的巯基乙醇的还原性。
5、还原型，非还原型。还原型LoadingBuffer中含有二硫苏糖醇（DTT）等还原剂，能够打开二硫键，更好地维持蛋白质的一二级结构。非还原型LoadingBuffer则没有这些还原剂。
proteina填料耐受dtt吗
1、”proteina亲和填料保存的注意事项是避免受到污染和避免受到极端温度、pH等的影响。避免受到污染：在使用之前，应该将亲和填料保存在干燥、无菌的环境中，并避免受到任何可能导致污染的物质的影响，如灰尘、细菌、病毒、酶等。
2、爱是两个人的事，如果你还执着着，纠缠着，原地打滚痛苦的爱着。时过境迁之后，你会发现，是自己挖了坑，下面埋葬的全部都是青春。
3、耐受。因为DTT是一种还原剂，可用于蛋白质抽提和蛋白质亚基的分离，ProteinA层析柱是特别为免疫球蛋白、抗体等偶联而设计的，所以proteina填料是耐受dtt的。
为什么不对血清做离心处理,使抗体浓度更高?
1、动物免疫3～5天后，如抗血清鉴定合格(见下节)，应在末次免疫后5～7天及时采血，否则抗体将会下降。因故未及时取血，则应补充免疫一次(肌肉、腹腔或静脉内注射，不加佐剂)，过5～7天取血。
2、运用恰当孔径的膜，同时优化转膜时间，关于高分子量蛋白可能需求更长的转膜时间。 ④ 抗体的运用。抗体的反响种属与实验类型需求可以满足实验的需求，此外，抗体的稀释比、孵育时间等问题也需求在实验中不时优化； ⑤ 蛋白与抗体分离率低。
3、血液标本采取后应尽可能早地自然地使血清(浆)从与血细胞接触的全血中分离出来。一般应于采血后2h内分离出血清或血浆。全血处理为血清或血浆分为离心前、离心中和离心后三个阶段，对各不同阶段均有具体要求。
4、试管凝集实验中要将抗体稀释成不同的浓度是为了看他的低度。
5、若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。
6、之后一些需要血清或者血浆检查的就要再经过离心处理后上仪器进行检查化验。
DTT()在280nm处有紫外吸收吗?
1、实验原理：大多数蛋白质分子结构中含有芳香族氨基酸（酪氨酸和色氨酸）残基，使蛋白质在280nm的紫外光区产生最大吸收，并且这一波长范围内的吸收值与蛋白质浓度的成正比，利用这一特性可定量测定蛋白质的含量。
2、有。二硫键有紫外吸收，某些蛋白质含有二硫键，也会在280nm附近吸收紫外光。近紫外吸收法就是根据这个性质，对蛋白质进行定量。
3、吸收高峰在280nm处，其吸光度（即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。
4、可以通过测定280 nm 处的紫外吸收值的方法对蛋白质溶液进行定量。氨基酸紫外吸收： Trp、Tyr、Phe的紫外吸收光谱的最大光吸收波长在280nm处，等条件下光吸收大小关系是，TrpTyrPhe。
5、对于芳香族氨基酸迅速、简便的测定方法是： 280nm紫外吸收法。芳香族氨基酸简介：芳香族氨基酸（aromatic amino acid）：凡含有芳香环的氨基酸都属于芳香族氨基酸。
6、此根据在230~280nm处有苯的精细结构吸收带，即可判断乙醇、环已烷中是否有微量杂质苯存在。具体方法应根据被检查的化合物(大量)与所含杂质(少量)的UV吸收情况来确定。
