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一抗孵育时间,不能超过多久
不可以。一抗是4度，孵育过夜16-20小时即可。孵育过久，会出现非特异性的条带。一抗的孵育时间与温度、抗体浓度有关。通常情况下，在37℃的条件下，孵育1-2小时左右。
到20小时。根据查询环保在线官网显示。一抗是4度，孵育过夜16到20小时即可。孵育过久，会出现非特异性的条带。一抗的孵育时间与温度、抗体浓度有关。在37摄氏度的条件下，孵育1到2小时。
内参的孵育时间通常为37℃1小时，25℃左右3小时左右，但具体的孵育时间可能会因实验条件和需求而有所不同。建议根据实验设计和具体条件来确定最佳的孵育时间。
合适的WB一抗孵育时间可以最大程度地提高Western Blot实验的准确性。如果孵育时间太短，抗体与目标蛋白质结合不足，无法检测到目标蛋白的表达情况。
一抗孵育温度有几种：4度、室温、37度，其中4度效果最佳；孵育时间与温度、抗体浓度有关，一般37度1-2h，4度过夜（从冰箱拿出后37度复温45min）。具体条件还要摸索。
western blot 一抗孵育4小时当然有影响的，一抗孵育时间太长容易导致非特异性吸附加深 一般可以室温孵育三十分，然后四度过夜。或者选择室温孵育2小时直接二抗。因为洗膜洗去的是未结合的抗体，抗体结合上就不容易洗掉了。
抗原抗体反应简介
1、【答案】：抗原与抗体发生结合反应的物质基础是抗原分子表面的抗原决定基和抗体分子表面的抗原结合部位之间结构的互补性，抗原抗体相互结合，在适宜条件下，出现可见反应。主要特点有：(1)抗原抗体间的结合具有高度特异性。
2、免疫反应性是指能与相应的免疫效应物质(抗体或致敏淋巴细胞)在体内外发事特异性结合反应的能力。抗体：机体在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。
3、抗原-抗体反应（antigen－antibody reaction），是抗原和对应抗体在一定条件下特异结合形成可逆性抗原－抗体复合物的过程。
4、生物学定义指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。这种反应既可在机体内进行，也可以在机体外进行。
抗原进入体内后,抗体产生的一般规律如何?
初次应当抗原初次进入机体时，需首先刺激有限的特异性细胞克隆繁殖才能达到足够的反应细胞数，表现为经一定时间的潜伏期才能在血液中检出抗体。
抗原初次进入机体后，经一定的潜伏期才能产生浆细胞并合成和分泌抗体。
抗体产生的一般规律是识别期、活化期、效应期，意义是指导预防接种及动物免疫血清的制备。规律：识别期：当人体遭遇细菌或病毒入侵时，体内的B淋巴细胞首先要识别外来抗原。
抗体产生的一般规律是：初次应当抗原初次进入机体时，需首先刺激有限的特异性细胞克隆繁殖才能达到足够的反应细胞数，表现为经一定时间的潜伏期才能在血液中检出抗体。
试述抗原抗体反应的原理。
1、【答案】：抗原与抗体发生结合反应的物质基础是抗原分子表面的抗原决定基和抗体分子表面的抗原结合部位之间结构的互补性，抗原抗体相互结合，在适宜条件下，出现可见反应。主要特点有：(1)抗原抗体间的结合具有高度特异性。
2、抗原抗体反应是抗原和相应抗体之间的特异性结合反应，这种特异性结合是基于抗原决定簇(表位)与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，即两者分子构型高度互补，而且抗原表位与抗体超变区必须紧密接触，才可能有足够的结合力。
3、若在溶液中加入一定量的电解质，则可中和胶体离子表面上的电荷，促使粒子相互吸引而出现凝集反应或沉淀反应等。此外，还有库伦吸引力、范德瓦耳斯力、氢键结合作用、疏水相互作用等分子间引力参与和促进抗原-抗体反应。
