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多克隆抗体技术的免疫动物
供免疫用的动物主要是哺乳动物和禽类,常选择家兔、绵羊、山羊、马、骡和豚鼠及小鼠等。动物的选择常根据抗体的用途和量来决定,也与抗原的性质有关。
②多克隆抗体的制备:将抗原免疫动物(常用的动物为兔、羊、狗等),分离出抗血清并纯化抗体。多克隆抗体的均一性较差,其特异性相对较低,因此,多克隆抗体在农药残留速测技术中的应用受到一定的限制。
选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试,看看是否成功免疫。如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。包括纯度以及特异性。
免疫用的动物最好选择适龄的健康雄性动物,雌性动物特别是妊娠动物用于制备免疫抗体则非常不合适,有时甚至不产生抗体。
【答案】:第一阶段以1890年Behring发现白喉抗毒素为代表,其特点是用抗原免疫动物来获得多克隆抗体。第二阶段以1975年Kohler创建杂交瘤技术制备单克隆抗体为代表。
一抗二抗为什么要不同的种属?
一抗和二抗必须来自不同种属的动物,确保在样品中的目标分子上形成特异性和稳定的免疫复合物。
二抗是抗一抗的Fc段,把一抗的Fc段打到同一种属里不会产生免疫反应,除非动物有自身免疫疾病,那也不会拿来做抗体,所以要选择另外一个种属制作二抗。
源性一抗如果需要做共定位,那么就需要不同源性的且要能够用于人组织的,可以做组化的,二抗建议选择驴抗,这样用处多;如果说是做组织化学,那么一抗源性就无所谓了只要能用于人的组织,二抗相应配套就行。
不能。因为同种动物细胞表面有类型不同、数量不同的抗体的受体FcR,你选择同种动物的抗体作为一抗可能有非常强的非特异性信号。如果检测人的某种抗原分子,可选择鼠抗人的抗体为一抗,再用兔抗鼠为二抗。
对于一抗为单克隆抗体的情况,其同型(Isotype)通常会在产品信息中给出,如果你的一抗同型是小鼠IgM(Isotype:IgM),那么相应的二抗就应该选择抗小鼠IgM。
确定实验样本的种属,Human,Mouse,还是Rat。二抗主要根据一抗种属来源来决定购买二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可。一抗二抗是指非抗体性抗原和能和抗体结合,即抗体的抗体。全称第一抗体、第二抗体。
鼠抗兔是什么意思
与兔相克的属相为鼠、牛、龙、鸡、马。兔:遇羊、狗、猪大吉,其它属相次吉。与龙相克的属相为狗、牛、龙、兔。龙:遇鼠、猴、鸡大吉,其它属相次吉 与蛇相克的属相为虎、猴、猪。蛇:遇牛、鸡大吉,其它属相次吉。
羊抗小鼠IgG:是用小鼠去免疫羊产生的IgG类抗体。羊抗兔IgG抗体同理。
内参也分兔抗鼠抗。根据相关公开资料显示,内参是内在参照,在各组织和细胞中表达相对恒定,在检测某些功能蛋白的表达水平变化时用做参照物,内参就分为兔抗鼠抗两种。
物种的差异:鼠和兔的免疫系统有着很大的物种差异,两者之间的免疫反应机制、免疫球蛋白的结构、抗原结合部位等等都存在很大的不同。因此,鼠抗可变区和兔抗的抗原结合部位可能不存在匹配,导致不结合抗原。
鼠:鼠与牛,如父母都属鼠,那么生个属牛的孩子是非常合适的,对于家中运势有很大的助运效果。而鼠猴龙又为三合生肖,所以生个属猴或属龙的孩子也是不错的选择。鼠与马相冲,生属马的孩子是最忌讳的。
基本是这个意思。第二个问题:兔子不能免疫兔子的。免疫的一个重要概念是识别“自己”和“非己”,如果对自己的蛋白产生免疫反应,那就麻烦了。可以类比器官移植,亲缘关系越近,越不容易产生免疫排斥。
tubin是兔抗还是鼠抗
1、一抗是兔和羊二抗可以有羊抗兔。跟一抗的种属对应,例:一抗是兔抗,那么对应二抗是抗兔,可以是羊抗兔,也可以是鼠抗兔,即一抗的种属决定二抗的反应性。
2、内参也分兔抗鼠抗。根据相关公开资料显示,内参是内在参照,在各组织和细胞中表达相对恒定,在检测某些功能蛋白的表达水平变化时用做参照物,内参就分为兔抗鼠抗两种。
3、这就是说马血清对兔具有免疫原性。---反应原性--能与其所诱导而产生的抗体或致敏淋巴细胞发生反应,或激发机体发生免疫应此性质称反应原性。
如何制备兔源多克隆抗体
1、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:制备抗原。选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试,看看是否成功免疫。如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。包括纯度以及特异性。
2、用剪刀剪去家兔两后脚掌的部分兔毛,以酒精及碘酒消毒皮肤; 第一次免疫: 用2ml注射器吸取弗氏完全佐剂(FCA)乳化的抗原(人IgG)下称FCA-IgG)液1ml,每侧脚掌皮下各注入0.5ml。
3、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:制备抗原。选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试,看看是否成功免疫。如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。
4、②多克隆抗体的制备:将抗原免疫动物(常用的动物为兔、羊、狗等),分离出抗血清并纯化抗体。多克隆抗体的均一性较差,其特异性相对较低,因此,多克隆抗体在农药残留速测技术中的应用受到一定的限制。
5、抗体一般分为多克隆抗体和单克隆抗体,多克隆抗体能与抗原的多个表位结合。本篇主要讲述兔来源的多克隆抗体的生产步骤 多抗一般制备流程:完全抗原的准备→兔子的免疫→ 效价检测和终放→抗体亲和纯化→抗体的浓缩和保存。
6、多克隆抗体的提取纯化 批量提取法 称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50g,置于1000ml烧杯中,先以蒸馏水漂浮除去细颗粒,再经酸碱处理后,用0.01~0.05mol/L,pH0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡。