本篇目录:
- 1、PI3K/Akt通路中,Akt和p-AKt抗体选择求助
- 2、测磷酸化的蛋白和做免疫共沉淀意义上的区别在哪?
- 3、AKT的Ser473是什么意思?应该怎么准确表述?
- 4、磷酸化和非磷酸化的抗体什么区别
- 5、研究资料较多的磷酸化抗体
PI3K/Akt通路中,Akt和p-AKt抗体选择求助
1、CsA和FK506分别与细胞浆 内环抱亲和素和FKBP12结合,抑制Calcinen,阻止细胞因子如白介素.2(IL一2) 的表达和转录,抑制T细胞活化的早期阶段4]l。RPM与FK506具有相似的分子 结构,也能与FKBP12结合,RAPA。
2、您好,很高兴为您解细胞因子刺激的信号转导通路:参与细胞的增殖、分化等,获得一个与SV40大T抗原相互作用的蛋白,因其分子并通过PI3K/AKT或Ras/ERK信号通路来发挥作用,因此是有可能的。
3、因为Akt信号通路是通过 磷酸化而活化的,也就是所谓的P-Akt。
4、PI3K/mTOR是一种胞内磷脂酰肌醇激酶,与v.src和v.ras等癌基因的产物相关;PI3K本身具有丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)激酶的活性,也具有磷脂酰肌醇激酶的活性。PI3K可以和蛋白激酶B(PKB,Akt)的N端PH结构域结合。
测磷酸化的蛋白和做免疫共沉淀意义上的区别在哪?
谢谢!但是无论是做IP还是WB,用的抗体都是磷酸化的抗体,应该说IP和WB用的抗体是一样的。如果只单纯WB去测总蛋白,而非磷酸化的那我想是没有意义的,信号转导关键就在蛋白磷酸化呀。
免疫共沉淀基于抗原抗体特异性结合的原理,体外验证两种分子之间是否存在相互作用的技术。它是免疫沉淀的延伸。基本原理是在含有已知抗原的细胞裂解液中,将已知抗原作为靶蛋白,检测裂解液中可能存在与之有相互作用的蛋白。
区别是pull-down一般是验证 体外 相互作用;免疫共沉淀一般用于检测细胞水平的 体内 相互作用。
IB每次只能检一种蛋白,所以要检两种蛋白的话,就需要检两次,一次是用是VSV抗体,一次是用标签抗体Flag;IP是共沉淀,多种蛋白均是带Flag标签表达的,所以一个Flag可以检出多种蛋白。
免疫共沉淀的话蛋白质是处于天然状态,蛋白质的相互作用可以在天然状态下进行,可以避免认为影响,还可以分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合体。
免疫共沉淀技术,将靶蛋白的抗体连接到固体基质上,再将可能与靶蛋白发生相互作用的待筛选蛋白加入反应体系中,用低离心力沉淀或微膜过滤法在固体基质和抗体的共同作用下将蛋白复合物沉淀到试管的底部或微膜上。
AKT的Ser473是什么意思?应该怎么准确表述?
Akt的Ser473可以被PDK1磷酸化。
使Akt从细胞质转移到细胞膜上.并在3一磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDKI)和3一磷酸肌醇依赖性蛋白激酶2(PDK2)的辅助下,分别使Akt蛋白上的苏氨酸磷酸化位点(Thr308)和丝氨酸磷酸化位点(Ser473)磷酸化而使其激活。
Akt又称PKB或Rac,在细胞存活和凋亡中起重要作用。胰岛素等生长和存活因子都可以激活Akt信号途径。Akt的Ser473可以被PDK1磷酸化。
磷酸化和非磷酸化的抗体什么区别
通常来说,磷酸化抗体芯片上检测某一个磷酸化位点会设置一对抗体,即:磷酸化的和非磷酸化的抗体。说到区别,可能从制备讲起你可以更加清晰一些。
普通抗体一般都是检测总蛋白,会出现一条以上的条带。但也有特例,如果抗原表位在磷酸化位点周围,那么抗磷酸化的抗体只能检测磷酸化底物,而普通抗体也只能检测非磷酸化底物。
磷酸化是指组成蛋白质的氨基酸的羟基被磷酸基团取代,去磷酸化就是磷酸集团在被还原成羟基。一般是很多酶磷酸化和去磷酸化的结构都不一样,导致功能会不一样,比如有的酶磷酸化以后有催化活性,去磷酸化后则没有活性。
tau蛋白可以分成三种不同形式:(1)胞浆非异常磷酸化tau蛋白(C-tau);(2)可溶性异常磷酸化tau蛋白(AD P-tau)和(3)异常磷酸化并聚合为双螺旋丝(paired helical filaments,PHF)结构的tau蛋白(PHF-tau)。
tau蛋白可以分成三种不同形式:(1)胞浆非异常磷酸化tau蛋白(C-tau);(2)可溶性异常磷酸化tau蛋白(AD P-tau)和(3)异常磷酸化并聚合为双螺旋丝(paired helical filaments,PHF)结构的tau蛋白(PHF-tau)。
总ERK(Total ERK)和磷酸化ERK(P-ERK)在WB实验中是两种不同的抗体,用于检测ERK1/2信号通路的不同状态。总ERK抗体可以检测所有形式的ERK1/2蛋白,包括磷酸化和非磷酸化的形式。
研究资料较多的磷酸化抗体
所谓磷酸化抗体是针对一个底物磷酸化和去磷酸化状态下的磷酸化位点而生产的抗体,这样利用底物磷酸化和去磷酸化时和抗体结合型的改变来研究底物是否被磷酸化,从而研究蛋白活性的变化。抗体本身被磷酸化的研究不是非常多。
CST啊!CST抗体受全球认可,CST是公认的最佳抗体品牌,提供的磷酸化抗体性能突出,引用文献的数量在业内也是领先的。
首先肯定是因为CST是磷酸化抗体起家,在修饰性抗体这种特异性灵敏性要求很高的抗体中占有绝对的领导地位。其次CST提供的磷酸化抗体,品质高,全球公认的好。而且CST的服务态度和服务质量很高,会提供抗体具体使用条件说明书。
磷酸化蛋白质的鉴定方法可以分为直接检测和间接检测两种。以下是几种常见的方法:免疫印迹(WB):通过使用特异性抗体来检测靶蛋白质的磷酸化状态。